兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒實(shí)驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

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8816 核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1 (NR3C1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8817 氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8818 組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8819 Ⅳ型膠原(COL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8820 糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8821 糖皮質(zhì)激素受體β(GRβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8822 1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 1,3-Bisphosphoglycerate (1,3-BPG) 48T/96T General
8823 高遷移率族蛋白17(HMG17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Mobility Group Protein 17 (HMG17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8824 胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase Activated DNase (CAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8825 蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase (PDI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8826 70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8827 泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8828 凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8829 多巴色素異構(gòu)酶(DT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dopachrome Tautomerase (DCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8830 YY肽(PYY)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptide YY (PYY) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8831 多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Multidrug Resistance Associated Protein 1 (MRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8832 二磷酸腺苷(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine Diphosphate (ADP) 48T/96T General
8833 類*(TPS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tryptase (TPS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8834 胃泌素釋放肽前體(ProGRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pro Gastrin Releasing Peptide (ProGRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8835 強(qiáng)啡肽(Dyn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Big Dynorphin (Dyn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8836 160kDa核孔蛋白(NUP160)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 160kDa (NUP160) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8837 去唾液酸糖蛋白受體1(ASGPR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8838 胎盤泌乳素(PL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Placental Lactogen (PL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8839 妊娠特異性β1-糖蛋白(PSG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1 (PSG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8840 *(LZM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8841 膠質(zhì)細(xì)胞成熟因子γ(MPFγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glia Maturation Factor Gamma (GMFg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8842 98kDa核孔蛋白(NUP98)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 98kDa (NUP98) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8843 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8844 鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8845 88kDa核孔蛋白(NUP88)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 88kDa (NUP88) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8846 精子特異性抗原2(SSFA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sperm Specific Antigen 2 (SSFA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8847 接觸蛋白1(CNTN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8848 蛋白激酶Cζ(PKCζ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8849 巨肌酸激酶(MCK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macro Creatine Kinase (MCK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8850 轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activating Transcription Factor 4 (ATF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8851 血管性血友病因子(vWF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8852 超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8853 髓過氧化物酶(MPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8854 D-二聚體(D2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for D-Dimer (D2D) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8855 雌激素受體α(ERα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Estrogen Receptor Alpha (ERa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8856 TBP結(jié)合轉(zhuǎn)錄向下調(diào)節(jié)因子1(DR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Down Regulator Of Transcription 1, TBP Binding (DR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8857 脯氨酰羧肽酶(PRCP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8858 中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) 48T/96T Homo sapiens兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 (Human)
8859 組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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