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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-31 09:07:10瀏覽次數(shù):436次
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兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
8272 小鼠骨成型蛋白質(zhì)7(BMP-7) Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit 96T/48T
8273 小鼠透明質(zhì)酸(HA) Mouse HA ELISA Kit 96T/48T
8274 小鼠25羥基*3(25(OH)D3) Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit 96T/48T
8275 小鼠肌紅蛋白(MYO) Mouse Myoglobin ELISA Kit 96T/48T
8276 小鼠血栓素(TXB2) Mouse Thromboxane B2 ELISA Kit 96T/48T
8277 小鼠乙酰*(ACh) Mouse acetylcholine ELISA Kit 96T/48T
8278 小鼠組織多肽抗原(TPA) Mouse Tissue Polypeptide Antigen ELISA Kit 96T/48T
8279 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) Mouse t-PA ELISA Kit 96T/48T
8280 小鼠β血小板球蛋白(β-TG) Mouse β-Thromboglobulin ELISA Kit 96T/48T
8281 小鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 Mouse dihy-drotestosterone ELISA Kit 96T/48T
8282 小鼠抗精子抗體(SPE) Mouse SPE(IgG,M) ELISA Kit 96T/48T
8283 小鼠腎上腺素(Epinephrine) Mouse Epinephrine ELISA Kit 96T/48T
8284 小鼠*(Noradrenalin) Mouse Noradrenalin ELISA Kit 96T/48T
8285 小鼠前列腺素E1(PGE1) Mouse PGE1 Elisa kit 96T/48T
8286 小鼠前列腺素F型(PGF) Mouse PGF ELISA Kit 96T/48T
8287 小鼠甲狀旁腺激素(PTH) Mouse PTH ELISA Kit 96T/48T
8288 小鼠醛固酮(ALD) Mouse ALD ELISA Kit 96T/48T
8289 小鼠促生長激素釋放激素(GRH) Mouse GRH ELISA Kit 96T/48T
8290 小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2) Mouse GCP-2 ELISA Kit 96T/48T
8291 小鼠BTC ELISA Kit Mouse BTC ELISA Kit 96T/48T
8292 小鼠血管生長素(Angiogenin) Mouse Angiogenin ELISA Kit 96T/48T
8293 小鼠環(huán)-磷酸腺苷(cAMP) Mouse cAMP ELISA Kit 96T/48T
8294 小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA Kit Mouse Macrophage MigRation Inhibitory Factor ELISA Kit 96T/48T
8295 小鼠孕激素(Progesterone) Mouse Progesterone ELISA kit 96T/48T
8296 小鼠雌激素(estrogen) Mouse estrogen ELISA Kit 96T/48T
8297 小鼠嗜酸性細(xì)胞選擇性趨化因子2(CCL24) ELISA Kit Mouse CCL24 ELISA Kit 96T/48T
8298 小鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISA Kit Mouse adiponectin ELISA Kit 96T/48T
8299 小鼠組胺(Histamine) Mouse Histamine Elisa kit 96T/48T
8300 小鼠骨鈣素(OT)ELISA Kit Mouse Osteocalcin(OT)ELISA kit 96T/48T
8301 小鼠抵抗素(Resistin) Mouse Resistin ELISA Kit 96T/48T
8302 小鼠催乳素(PRL) mouse PRL ELISA Kit 96T/48T
8303 小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH) mouse ACTH ELISA Kit 96T/48T
8304 小鼠促卵泡素(FSH) mouse FSH ELISA Kit 96T/48T
8305 小鼠β-內(nèi)啡肽(Beta-Endorphin) mouse Beta-Endorphin ELISA Kit 96T/48T
8306 小鼠腦鈉肽 Mouse Nt-proBNP ELISA KIT 96T/48T
8307 小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98) Mouse Pro-ANP(1-98) ELISA Kit 96T/48T
8308 小鼠大內(nèi)皮素(BigET) Mouse BigET ELISA Kit 96T/48T
8309 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1) Mouse Endothelin-1 ELISA Kit 96T/48T
8310 小鼠降鈣素(CT) Mouse CT ELISA Kit 96T/48T
8311 小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(sPANKL) Mouse sPANKL ELISA Kit 96T/48T
8312 小鼠促甲狀腺素(TSH) Mouse TSH ELISA Kit 96T/48T
8313 小鼠*(Cortisol) Mouse Cortisol ELISA Kit 96T/48T
8314 小鼠雌二醇(E2) Mouse Estradiol ELISA Kit 96T/48T
8315 小鼠去氫表雄酮(DHEA-S) Mouse DHEA-S ELISA Kit 96T/48T
8316 小鼠孕酮(PROG) Mouse PROG ELISA Kit 96T/48T
8317 小鼠睪酮(Testoterone) Mouse Testoterone ELISA Kit 96T/48T
8318 小鼠游離睪酮(Free-Testoterone) Mouse Free-Testoterone ELISA Kit 96T/48T
8319 小鼠雄烯二酮(ASD) Mouse Androstenedione ELISA Kit 96T/48T
8320 小鼠雌三醇Estriol Mouse Estriol ELISA Kit 96T/48T
8321 小鼠17-羥-孕酮(17-ANP) Mouse 17-ANP ELISA Kit 96T/48T
8322 小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3) Mouse T3 ELISA Kit 96T/48T
8323 小鼠甲狀腺素(T4)兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Mouse T4 ELISA Kit 96T/48T
8324 小鼠游離甲狀腺素(Free-T4) Mouse Free-T4 ELISA Kit 96T/48T
8325 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3) Mouse Free-T3 ELISA Kit 96T/48T
8326 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4) Mouse NN-T4 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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