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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-19 21:49:00瀏覽次數(shù):345次
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兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
8215 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS) Mouse Endothelial nitric oxide synthase ELISA Kit 96T/48T
8216 小鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2) Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit 96T/48T
8217 小鼠熱休克蛋白90(HSP90) Mouse Heat Shock Protein 90 ELISA Kit 96T/48T
8218 小鼠熱休克蛋白70(HSP70) Mouse Heat Shock Protein 70 ELISA Kit 96T/48T
8219 小鼠熱休克蛋白40(HSP40) Mouse Heat Shock Protein 40 ELISA Kit 96T/48T
8220 小鼠熱休克蛋白20(HSP20) Mouse Heat Shock Protein 20 ELISA Kit 96T/48T
8221 小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40) Mouse Amyloid-β-Protein(1-40) ELISA Kit 96T/48T
8222 小鼠細胞周期素D3(Cyclin D3) Mouse Cyclin D3 ELISA Kit 96T/48T
8223 小鼠細胞周期素D2(Cyclin D2) Mouse Cyclin D2 ELISA Kit 96T/48T
8224 小鼠細胞周期素D1(Cyclin D1) Mouse Cyclin D1 ELISA Kit 96T/48T
8225 小鼠髓磷脂堿蛋白(MBP) Mouse MBP ELISA Kit 96T/48T
8226 小鼠甲胎蛋白(AFP) Mouse AFP ELISA Kit 96T/48T
8227 小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP) Mouse PAP ELISA Kit 96T/48T
8228 小鼠游離前列腺特異性抗原(FREE PSA) Mouse FREE PSA ELISA Kit 96T/48T
8229 小鼠前列腺特異性抗原(PSA) Mouse PSA ELISA Kit 96T/48T
8230 小鼠血紅素氧合酶1(HO-1) Mouse heme oxygenase-1 ELISA Kit 96T/48T
8231 小鼠磷脂酶A2(sPLA2) Mouse Phospholipidase A2 elisa kit 96T/48T
8232 小鼠水通道蛋白5(AQP5) Mouse Aquaporin5 ELISA Kit 96T/48T
8233 小鼠水通道蛋白4(AQP4) Mouse Aquaporin4 ELISA Kit 96T/48T
8234 小鼠水通道蛋白3(AQP3) Mouse Aquaporin3 ELISA Kit 96T/48T
8235 小鼠水通道蛋白1(AQP1) Mouse Aquaporin1 ELISA Kit 96T/48T
8236 小鼠水通道蛋白0(AQP0) Mouse Aquaporin0 ELISA Kit 96T/48T
8237 小鼠水通道蛋白2(AQP2) Mouse Aquaporin2 ELISA Kit 96T/48T
8238 小鼠甲狀腺球蛋白(TG) Mouse Thyroglobulin ELISA Kit 96T/48T
8239 小鼠抑制素A(INH A) Mouse Inhibin A ELISA Kit 96T/48T
8240 小鼠絨毛膜*β(β-HCG) Mouse β-HCG ELISA Kit 96T/48T
8241 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG) Mouse SHBG ELISA Kit 96T/48T
8242 小鼠脫氫表雄酮-S-7(DHEA-S-7) Mouse DHEA-S-7 ELISA Kit 96T/48T
8243 小鼠脫氫表雄酮(DHEA) Mouse DHEA ELISA Kit 96T/48T
8244 小鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1) Mouse mobility group box-1 protein ELISA Kit 96T/48T
8245 小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A) Mouse pregnancy associated plasma protein-A ELISA Kit 96T/48T
8246 小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL) Mouse Endothelial lipase ELISA Kit 96T/48T
8247 小鼠碳酸酐酶(CA) Mouse carbonic anhydrase ELISA Kit 96T/48T
8248 小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP) Mouse calcitonin gene related peptide ELISA Kit 96T/48T
8249 小鼠胃動素(MTL) Mouse Motilin ELISA Kit 96T/48T
8250 小鼠*(SS) Mouse Somatostatin ELISA Kit 96T/48T
8251 小鼠纖維蛋白原(FB) Mouse FB ELISA Kit 96T/48T
8252 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (Actinin α ) Mouse Actinin α ELISA Kit 96T/48T
8253 小鼠肌球蛋白(Myosin) Mouse Myosin ELISA Kit 96T/48T
8254 小鼠結(jié)蛋白(Desmin) Mouse Desmin ELISA Kit 96T/48T
8255 小鼠組織相容性復(fù)合物(MHC) Mouse major histocompatibility complex ELISA Kit 96T/48T
8256 小鼠上皮中性粒細胞活化肽(ENA-78). Epithelial neutrophil activating peptide-78 ELISA Kit 96T/48T
8257 小鼠抗*(AT-III) Mouse AT-III ELISA Kit 96T/48T
8258 小鼠神經(jīng)肽(NPY) Rat neuropeptide Y ELISA Kit 96T/48T
8259 小鼠生長激素釋放多肽(ghrelin) Mouse ghrelin ELISA Kit 96T/48T
8260 小鼠Gelsolin Mouse Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
8261 小鼠核因子活化因子受體配體(RANKL) Mouse receptor activator of nuclear factor kappaB ligand ELISA Kit 96T/48T
8262 小鼠血栓前體蛋白(TpP) Mouse TpP ELISA Kit 96T/48T
8263 小鼠*釋放激素(GnRH) Mouse GnRH ELISA Kit 96T/48T
8264 小鼠抑制素B兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒(INH B0 Mouse inhibin B ELISA Kit 96T/48T
8265 小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH) Mouse thyrotropin-releasing hormone ELISA KIT 96T/48T
8266 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH) Mouse CRH ELISA Kit 96T/48T
8267 小鼠胰島素受體β(ISR-β) Mouse Insulin Receptor β(ISR-β)ELISA KIT 96T/48T
8268 小鼠糖化血紅蛋白(HbA1c) Mouse HbA1c ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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