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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-14 18:27:41瀏覽次數(shù):211次
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兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
7375 大鼠CCL17 Rat CCL17 ELISA Kit 96T/48T
7376 大鼠CCL2 Rat CCL2 ELISA Kit 96T/48T
7377 大鼠CCL20 Rat CCL20 ELISA Kit 96T/48T
7378 大鼠CCL21 Rat CCL21 ELISA Kit 96T/48T
7379 大鼠CCL24 Rat CCL24 ELISA Kit 96T/48T
7380 大鼠CCL26 Rat CCL26 ELISA Kit 96T/48T
7381 大鼠CCL3 Rat CCL3 ELISA Kit 96T/48T
7382 大鼠CCL7 Rat CCL7 ELISA Kit 96T/48T
7383 大鼠CCL22 Rat CCL22 ELISA Kit 96T/48T
7384 大鼠CD14 Rat CD14 ELISA Kit 96T/48T
7385 大鼠CD163 Rat CD163 ELISA Kit 96T/48T
7386 大鼠CD23 Rat CD23 ELISA Kit 96T/48T
7387 大鼠CD26 Rat CD26 ELISA Kit 96T/48T
7388 大鼠CD40L Rat CD40L ELISA Kit 96T/48T
7389 大鼠CINC-1 Rat CINC-1 ELISA Kit 96T/48T
7390 大鼠CINC-2a/b Rat CINC-2a/b ELISA Kit 96T/48T
7391 大鼠CINC-3 Rat CINC-3 ELISA Kit 96T/48T
7392 大鼠CXCL2/MIP-2 Rat CXCL2/MIP-2 ELISA Kit 96T/48T
7393 大鼠CXCL9/MIG Rat CXCL9/MIG ELISA Kit
7394 大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13) Rat BLC-1/CXCL13 ELISA Kit 96T/48T
7395 大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子10(CXCL11) Rat CXCL10 ELISA Kit 96T/48T
7396 大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子12(CXCL12) Rat CXCL12 ELISA Kit 96T/48T
7397 大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子16(CXCL16) RatCXCL16 ELISA Kit 96T/48T
7398 大鼠脂聯(lián)素(ADT) Rat Adiponectin ELISA Kit 96T/48T
7399 大鼠抗嗜中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA) Rat ANCA ELISA Kit 96T/48T
7400 大鼠8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG) Rat 8-hydroxy-2-deoxyguanosine ELISA Kit 96T/48T
7401 大鼠14-3-3蛋白(14-3-3 pro) Rat 14-3-3 protein ELISA Kit 96T/48T
7402 大鼠Apelin-12 Rat Apelin-12 ELISA Kit 96T/48T
7403 大鼠活化蛋白C Rat Acti-vated protein C ELISA Kit 96T/48T
7404 大鼠ATP酶 Rat Adenosinetriphosphatase ELISA Kit 96T/48T
7405 大鼠Aβ1-40蛋白 Rat Aβ1-40 protein ELISA Kit 96T/48T
7406 大鼠Aβ1-42蛋白 Rat Aβ1-42 protein ELISA Kit 96T/48T
7407 大鼠心肌細(xì)胞膜B1-AR Rat B1-AR ELISA Kit 96T/48T
7408 大鼠BALP Rat BALP ELISA Kit 96T/48T
7409 大鼠I 型膠原C 端肽 Rat CTX-I ELISA Kit 96T/48T
7410 大鼠內(nèi)皮素(ET-1) Rat Endothelin-1 ELISA Kit 96T/48T
7411 大鼠*IX Rat F IX ELISA Kit 96T/48T
7412 大鼠*原片段F1+2 Rat F1+2 ELISA Kit 96T/48T
7413 大鼠生長激素釋放肽(Ghrelin) Rat Ghrelin ELISA Kit 96T/48T
7414 大鼠*過氧化物酶(GSH-PX) Rat GSH-PX ELISA Kit 96T/48T
7415 大鼠同型半胱氨(HCY) Rat HCY ELISA Kit 96T/48T
7416 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) Rat LBP ELISA Kit 96T/48T
7417 大鼠脂多糖(LPS) Rat LPS ELISA Kit 96T/48T
7418 大鼠髓樣分化蛋白-2(MD2) Rat MD2 ELISA Kit 96T/48T
7419 大鼠α1微球蛋白(MGα1) Rat MGα1 ELISA Kit 96T/48T
7420 大鼠β2微球蛋白(MGβ2) Rat MGβ2 ELISA Kit 96T/48T
7421 大鼠一氧化氮(NO)ELISA Rat NO ELISA Kit 96T/48T
7422 大鼠NF-kB Rat NF-kB ELISA Kit 96T/48T
7423 大鼠CCL1 Rat CCL1 ELISA Kit 96T/48T
7424 大鼠補(bǔ)體片斷C3a(C3a) Rat C3a ELISA Kit 96T/48T
7425 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 Rat Follistatin ELISA Kit 96T/48T
7426 大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD) 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 Rat Histone Deacetylase ELISA Kit 96T/48T
7427 大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒 Rat E-Selectin ELISA kit 96T/48T
7428 大鼠甲基化酶(Methylase) Rat Methylase ELISA Kit 96T/48T
7429 大鼠增殖細(xì)胞抗原(PCNA) Rat PCNA ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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