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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-22 04:05:15瀏覽次數(shù):219次
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兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
5438 人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)ELISA Kit,48T/96T
5439 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5440 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5441 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5442 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5443 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA Kit,48T/96T
5444 犬肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA Kit,48T/96T
5445 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA Kit,48T/96T
5446 人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5447 小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5448 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5449 人遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA Kit,48T/96T
5450 大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA Kit,48T/96T
5451 犬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5452 駱駝內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5453 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5454 人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5455 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5456 猴子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5457 豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5458 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5459 兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5460 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5461 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5462 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5463 人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5464 小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5465 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5466 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5467 小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5468 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5469 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA Kit,48T/96T
5470
5471 人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA Kit,48T/96T
5472 人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA Kit,48T/96T
5473 人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA Kit,48T/96T
5474 人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA Kit,48T/96T
5475 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)ELISA Kit,48T/96T
5476 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA Kit,48T/96T
5477 人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA Kit,48T/96T
5478 兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA Kit,48T/96T
5479 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA Kit,48T/96T
5480 人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA Kit,48T/96T
5481 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA Kit,48T/96T
5482 人抗人絨毛膜*抗體(AhCGAb)ELISA Kit,48T/96T
5483 人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA Kit,48T/96T
5484 人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA Kit,48T/96T
5485 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA Kit,48T/96T
5486 人單純皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA Kit,48T/96T
5487 人抗生長激素抗體(GHAb)ELISA Kit,48T/96T
5488 人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)ELISA Kit,48T/96T
5489 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA Kit,48T/96T
5490 人D二聚體(D2D)ELISA Kit,兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒48T/96T
5491 豬D二聚體(D2D)ELISA Kit,48T/96T
5492 兔子D二聚體(D2D)ELISA Kit,48T/96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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