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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-16 03:21:43瀏覽次數(shù):346次
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兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
4561 小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA Kit,48T/96T
4562 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA Kit,48T/96T
4563 人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA Kit,48T/96T
4564 人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit,48T/96T
4565 小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit,48T/96T
4566 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit,48T/96T
4567 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA Kit,48T/96T
4568 小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA Kit,48T/96T
4569 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA Kit,48T/96T
4570 人淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA Kit,48T/96T
4571 小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA Kit,48T/96T
4572 大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA Kit,48T/96T
4573 人末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit,48T/96T
4574 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit,48T/96T
4575 大鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit,48T/96T
4576 人血管緊張素原(aGT)ELISA Kit,48T/96T
4577 小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA Kit,48T/96T
4578 大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA Kit,48T/96T
4579 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA Kit,48T/96T
4580 小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA Kit,48T/96T
4581 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA Kit,48T/96T
4582 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit,48T/96T
4583 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit,48T/96T
4584 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit,48T/96T
4585 人妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T
4586 小鼠妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T
4587 大鼠妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T
4588 人腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit,48T/96T
4589 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit,48T/96T
4590 大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit,48T/96T
4591 人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA Kit,48T/96T
4592 小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA Kit,48T/96T
4593 豬膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA Kit,48T/96T
4594 大鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA Kit,48T/96T
4595 人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA Kit,48T/96T
4596 小鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA Kit,48T/96T
4597 大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA Kit,48T/96T
4598 人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit,48T/96T
4599 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit,48T/96T
4600 大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA Kit,48T/96T
4601 人鞘磷脂(SM)ELISA Kit,48T/96T
4602 犬β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4603 駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4604 人β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4605 馬β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4606 小鼠β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4607 大鼠β內啡肽(β-EP)ELISA Kit,48T/96T
4608 人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,48T/96T
4609 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,48T/96T
4610 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,48T/96T
4611 犬5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒48T/96T
4612 人5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,48T/96T
4613 小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA Kit,48T/96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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