兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

03341 *(SCT)ELISA試劑盒 Salmon calcitonin,SCT ELISA Kit 96T/48T
03342 魚(yú)類(lèi)甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Fish Thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
03343 魚(yú)雌二醇(E2)ELISA試劑盒 E2 ELISA  96T/48T
03344 魚(yú)促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 ACTH ELISA Kit 96T/48T
03345 魚(yú)雌激素(E)ELISA試劑盒 E ELISA Kit  96T/48T
03346 魚(yú)促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 FSH ELISA Kit 96T/48T
03347 魚(yú)促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 LH ELISA Kit  96T/48T
03348 魚(yú)磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 AMPK ELISA Kit  96T/48T
03349 魚(yú)卵黃高磷蛋白(PV)ELISA試劑盒 PV ELISA Kit 96T/48T
03350 魚(yú)類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 MHC ELISA Kit 96T/48T
03351 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 C3 ELISA Kit 96T/48T
03352 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 C4 ELISA Kit  96T/48T
03353 魚(yú)類(lèi)白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒 IL-1α ELISA Kit  96T/48T
03354 魚(yú)類(lèi)白介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒 IL-1β ELISA Kit 96T/48T
03355 鯉魚(yú)卵黃蛋白原（VTG）ELISA試劑盒 VTG ELISA Kit 96T/48T
03356 魚(yú)類(lèi)*釋放激素（GnRH）ELISA試劑盒 GnRH ELISA Kit  96T/48T
03357 魚(yú)類(lèi)三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 96T/48T
03358 魚(yú)類(lèi)*(Cortisol)ELISA試劑盒 Fish Cortisol ELISA Kit 96T/48T
03359 魚(yú)類(lèi)超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit  96T/48T
03360 魚(yú)骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit 96T/48T
03361 植物磷脂酰甘油(PG)ELISA試劑盒  Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA Kit 96T/48T
03362 植物玉米索核苷（ZR ）ELISA試劑盒 Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 96T/48T
03363 植物赤霉素（GA） ELISA試劑盒 Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit 96T/48T
03364 植物血凝素（PHA ）ELISA試劑盒 phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 96T/48T
03365 植物生長(zhǎng)激素（GH ）ELISA試劑盒  Plant growth hormone,GH ELISA Kit  96T/48T
03366 植物凝脂酸（PA ）ELISA試劑盒  Plant phosphatidic acid,PA ELISA Kit  96T/48T
03367 植物吲哚乙酸（IAA） ELISA試劑盒 Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit 96T/48T
03368 麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒  Wheat germ agglutinin,WGA ELISA Kit 96T/48T
03369 荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒  Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA Kit 96T/48T
03370 槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒  Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA Kit 96T/48T
03371 花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒  Peanut agglutinin,PNA ELISA Kit 96T/48T
03372 大豆凝集素(SBA)ELISA試劑盒  Soybean agglutinin,SBA ELISA Kit 96T/48T
03373 菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒  Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA Kit 96T/48T
03374 扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒  Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA Kit 96T/48T
03375 蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒  Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA Kit 96T/48T
03376 豌豆凝集素(PSA)ELISA試劑盒  Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit 96T/48T
03377 雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試劑盒  Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA Kit 96T/48T
03378 植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒  Plant calmodulin,CAM ELISA Kit  96T/48T
03379 植物激素脫落酸（ABA ）ELISA試劑盒 Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA Kit 96T/48T
03380 植物*1(VK1)ELISA試劑盒  Plant Vitamin K1,VK1 ELISA Kit  96T/48T
03381 植物*12(VB12)ELISA試劑盒  Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit  96T/48T
03382 植物*(VA)ELISA試劑盒  Plant Vitamin A,VA ELISA Kit  96T/48T
03383 植物*(VE)ELISA試劑盒  Plant Vitamin E,VE EELISA Kit  96T/48T
03384 植物*2(VD2)ELISA試劑盒  Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit  96T/48T
03385 植物*3(VD3)ELISA試劑盒  Plant Vitamin D3,VD3 ELISA Kit  96T/48T
03386 植物*(VD)ELISA試劑盒  Plant Vitamin D,VD ELISA Kit  96T/48T
03387 植物*6(VB6)ELISA試劑盒  Plant Vitamin B6,VB6 ELISA Kit  96T/48T
03388 植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒  Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit  兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒96T/48T
03389 植物*(VC)ELISA試劑盒  Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit  96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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