兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

03028 雞表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒  Chicken Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit  96T/48T
03029 雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒  Chicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit  96T/48T
03030 雞生長激素(GH)ELISA試劑盒  Chicken growth hormone,GH ELISA Kit  96T/48T
03031 雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒 Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit  96T/48T
03032 雞傳染性鼻炎抗體(IC)ELISA試劑盒 Chicken infectious coryza,ic ELISA Kit 96T/48T
03033 雞透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 Chicken Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
03034 雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒 Chicken prolactin,PRL ELISA Kit 96T/48T
03035 雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒 Chicken Avian Leukosis Virus AG,ALV-AG ELISA Kit 96T/48T
03036 雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit  96T/48T
03037 雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit 96T/48T
03038 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒  Chicken Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit  96T/48T
03039 雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
03040 雞碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Chicken carbonic anhydrase,CA ELISA Kit 96T/48T
03041 雞抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Chicken Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit  96T/48T
03042 雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒  Chicken Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit  96T/48T
03043 雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit  96T/48T
03044 雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit  96T/48T
03045 雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒  Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit  96T/48T
03046 雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
03047 雞一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Chicken nitric oxide,NO ELISA Kit  96T/48T
03048 雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒  Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit  96T/48T
03049 雞補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒 Chicken Complement 3 split product,C3SP ELISA Kit  96T/48T
03050 雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒  Chicken adrenomedullin,ADM ELISA Kit 96T/48T
03051 雞巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit 96T/48T
03052 雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒  Chicken Immune RNA,Irna ELISA Kit 96T/48T
03053 雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒  Chicken β-lactamase ELISA Kit 96T/48T
03054 雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒 Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit  96T/48T
03055 雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒 Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit  96T/48T
03056 雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Chicken Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit  96T/48T
03057 雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒 Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit  96T/48T
03058 雞L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒  Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit  96T/48T
03059 雞*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒  Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit  96T/48T
03060 雞B因子(BF)ELISA試劑盒 Chicken factor B,BF ELISA Kit  96T/48T
03061 雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒  Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit  96T/48T
03062 雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒  Chicken Laminin,LN ELISA Kit  96T/48T
03063 雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Chicken 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit  96T/48T
03064 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit  96T/48T
03065 雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 Chicken glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit  96T/48T
03066 雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒  Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit  96T/48T
03067 雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒  Chicken 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit  96T/48T
03068 雞可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit 96T/48T
03069 兔雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒  Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit 96T/48T
03070 兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒96T/48T
03071 兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit  96T/48T
03072 兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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