兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

01623 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 96T/48T
01624 人N-乙?；?絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit  96T/48T
01625 人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit  96T/48T
01626 人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA試劑盒 Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 96T/48T
01627 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
01628 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit  96T/48T
01629 人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒 Human gelson ELISA Kit 96T/48T
01630 人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒 Human talin ELISA Kit 96T/48T
01631 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 96T/48T
01632 小鼠FMS樣*激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit  96T/48T
01633 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 Mouse glucoprotein 130,gp130 ELISA Kit  96T/48T
01634 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 Mouse intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit  96T/48T
01635 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Mouse Interferon γ ,IFN-γ ELISA KitKit 96T/48T
01636 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit  96T/48T
01637 小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit  96T/48T
01638 小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit 96T/48T
01639 小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒 Mouse fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit  96T/48T
01640 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Mouse Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit  96T/48T
01641 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit  96T/48T
01642 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒  Mouse interleukin 10,IL-10 ELISA Kit  96T/48T
01643 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 11,IL-11 ELISA Kit  96T/48T
01644 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 15,IL-15 ELISA Kit 96T/48T
01645 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit  96T/48T
01646 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit  96T/48T
01647 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit  96T/48T
01648 小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit  96T/48T
01649 小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit  96T/48T
01650 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 Mouse Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit  96T/48T
01651 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 Mouse Leptin,LEP ELISA Kit  96T/48T
01652 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit  96T/48T
01653 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β,MIP-1β ELISA Kit  96T/48T
01654 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 3α,MIP-3α ELISA Kit  96T/48T
01655 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit 96T/48T
01656 小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit  96T/48T
01657 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒  Mouse β-Defensins,β-DF ELISA Kit 96T/48T
01658 小鼠IgG ELISA試劑盒 Mouse IgG ELISA Kit 96T/48T
01659 小鼠IgM ELISA試劑盒 Mouse IgM ELISA Kit 96T/48T
01660 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒  Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
01661 小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒  Mouse anti-red cell antibody ELISA Kit  96T/48T
01662 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒  Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit  96T/48T
01663 小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒  Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 96T/48T
01664 小鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒  Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 96T/48T
01665 小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒  Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit 96T/48T
01666 小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒  Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2,AFP-L2 ELISA Kit 96T/48T
01667 小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒  Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ELISA Kit 96T/48T
01668 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒  Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 96T/48T
01669 小鼠磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒  Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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