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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-16 13:12:59瀏覽次數(shù):211次
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兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
01527 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA Kit 96T/48T
01528 人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit 96T/48T
01529 人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit 96T/48T
01530 人*(AZT)ELISA試劑盒 human Azidothymidine,AZT ELISA Kit 96T/48T
01531 人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒 Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit 96T/48T
01532 人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 Human phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 96T/48T
01533 人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒 Human phospholamban,PLN ELISA Kit 96T/48T
01534 人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒 Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit 96T/48T
01535 人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒 Human IPO-38 ELISA Kit 96T/48T
01536 人切除修復(fù)交叉互補基因1(ERCC1)ELISA試劑盒 human excision repair cross-complementation group 1,ERCC1 ELISA Kit 96T/48T
01537 人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒 human phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISA Kit 96T/48T
01538 人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒 Human paxillin,Pax ELISA Kit 96T/48T
01539 人小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒 Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit 96T/48T
01540 人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒 human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA Kit 96T/48T
01541 人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒 human orosomucoid 2,ORM2 ELISA Kit 96T/48T
01542 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒 human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit 96T/48T
01543 人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒 human claudin 14,CLDN14 ELISA Kit 96T/48T
01544 人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒 human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 ELISA Kit 96T/48T
01545 人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒 human major vault protein,MVP ELISA Kit 96T/48T
01546 人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒 human ubiquitin D,UBD ELISA Kit 96T/48T
01547 人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒 human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit 96T/48T
01548 人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒 human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 LISA Kit 96T/48T
01549 人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒 human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 96T/48T
01550 人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒 human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 96T/48T
01551 人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒 Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 96T/48T
01552 人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒 Human TU3A Protein ELISA Kit 96T/48T
01553 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 96T/48T
01554 人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒 Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 96T/48T
01555 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒 Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 96T/48T
01556 人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒 Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 96T/48T
01557 人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒 Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 96T/48T
01558 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit 96T/48T
01559 人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 96T/48T
01560 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 96T/48T
01561 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 96T/48T
01562 人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒 Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit 96T/48T
01563 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 96T/48T
01564 人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit 96T/48T
01565 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit 96T/48T
01566 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit 96T/48T
01567 人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 96T/48T
01568 人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 96T/48T
01569 人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 Human cecropin B,CecB ELISA Kit 96T/48T
01570 人抗菌肽(Att)ELISA試劑盒 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 Human Attacin,Att ELISA Kit 96T/48T
01571 人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒 Human granulysin,GNLY ELISA Kit 96T/48T
01572 人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒 Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit 96T/48T
01573 *樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒 Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit 96T/48T
01574 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒 Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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