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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-19 14:30:37瀏覽次數(shù):201次
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兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
01431 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒 Human membrane IgD,mIgD ELISA Kit 96T/48T
01432 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 Human killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR ELISA Kit 96T/48T
01433 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒 Human killer cell lectin-like receptor,KLR ELISA Kit 96T/48T
01434 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒 Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit 96T/48T
01435 人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒 Human membrane attack complex,MAC ELISA Kit 96T/48T
01436 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 Human EuglobulinLysis,EL ELISA Kit 96T/48T
01437 人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 Human free haemoglobin,f-Hb ELISA Kit 96T/48T
01438 人*1(PRM1)ELISA試劑盒 Human Protamine 1,PRM1 ELISA Kit 96T/48T
01439 人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 Human carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit 96T/48T
01440 人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒 Human plaet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit 96T/48T
01441 人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA試劑盒 Human plaet-associated Complement 3,PAC3 ELISA Kit 96T/48T
01442 人血栓素A2(TX-A2)ELISA試劑盒 Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit 96T/48T
01443 人血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒 Human Hemoglobin H,HbH ELISA Kit 96T/48T
01444 人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒 Human Cryoglobulin,CG ELISA Kit 96T/48T
01445 人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 Human erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 96T/48T
01446 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 Human Methemoglobin,MHB ELISA Kit 96T/48T
01447 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 Human low molecular weight heparin,LMWH ELISA Kit 96T/48T
01448 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒 Human Complement 3 split product,C3SP ELISA Kit 96T/48T
01449 人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 3b rccptor,C3bR ELISA Kit 96T/48T
01450 人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒 Human Complement 1 inhibitor autoantibody,C1INH ELISA Kit 96T/48T
01451 人B因子(BF)ELISA試劑盒 Human factor B,BF ELISA Kit 96T/48T
01452 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 4b,C4b ELISA Kit 96T/48T
01453 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 5b,C5b ELISA Kit 96T/48T
01454 *重鏈(IgH)ELISA試劑盒 Human immunoglobulin heavy chain,IgH ELISA Kit 96T/48T
01455 *重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 Human immunoglobulin heavy chain variable region,IgHV ELISA Kit 96T/48T
01456 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 polyimmunoglobulinreceptor,poly-IgR ELISA Kit 96T/48T
01457 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 Human hemoglobin-advanced glycosylation end products,Hb-AGE ELISA Kit 96T/48T
01458 人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒 Human membrane IgA,mIgA ELISA Kit 96T/48T
01459 *j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒 Human immunoglubin joining chain,Ig-j ELISA Kit 96T/48T
01460 人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒 Human β-subunits of hemoglobin,HB-β ELISA Kit 96T/48T
01461 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒 Human secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit 96T/48T
01462 人活化*Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒 Human activated coagulation factor Ⅻ,FⅫa ELISA Kit 96T/48T
01463 人異常*原(APT)ELISA試劑盒 Human Abnormal prothrombin,APT ELISA Kit 96T/48T
01464 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒 Human circulating immune complex,CIC ELISA Kit 96T/48T
01465 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒 Human Plaet associated antibody,PA-IgM ELISA Kit 96T/48T
01466 人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒 Human fibrinopeptide A,FPA ELISA Kit 96T/48T
01467 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA-4 ELISA Kit 96T/48T
01468 *輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒 Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit 96T/48T
01469 人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒 Human peptide major histocompatibility complex,pMHC ELISA Kit 96T/48T
01470 人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)ELISA試劑盒 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,CLA ELISA Kit 96T/48T
01471 人*血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA試劑盒 Human thrombinthrombomodulin compound,T-TM ELISA Kit 96T/48T
01472 人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA試劑盒 Human Hemolytic complement,Hc ELISA Kit 96T/48T
01473 人T細(xì)胞受體(TCR)ELISA試劑盒 Human T cell receptor,TCR ELISA Kit 96T/48T
01474 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 Human lupus anticoagulant,LAC/LA ELISA Kit 96T/48T
01475兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒 Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 96T/48T
01476 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 96T/48T
01477 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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