兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

00097 人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒 Human brain natriuretic peptide，BNP ELISA Kit 96T/48T
00098 人細(xì)胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒 Human cytokeratin 20，CK20 ELISA Kit 96T/48T
00099 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP ELISA Kit 96T/48T
00100 人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒  Human cytokeratin 13，CK-13 ELISA Kit 96T/48T
00101 人細(xì)胞角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒 Human cytokeratin 17，CK-17 ELISA Kit  96T/48T
00102 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒 human B-cell leukemia/lymphoma 3，Bcl3 ELISA Kit 96T/48T
00103 人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 Human P27 protein ELISA Kit 96T/48T
00104 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 Human mucin-5 subtype B，MUC5B ELISA Kit 96T/48T
00105 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒 Human Dickkopf 1，DKK1 ELISA Kit 96T/48T
00106 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒 Human CA724 ELISA Kit 96T/48T
00107 人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒  Human Transfer factor，TF ELISA Kit 96T/48T
00108 人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒 Human Colon Cancer Antigen，CCA ELISA Kit 96T/48T
00109 人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒  Human cytokeratin 18，CK-18 ELISA Kit 96T/48T
00110 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒 Human soluble transferrin receptor，sTfR ELISA Kit 96T/48T
00111 人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 Human Metallothionein，MT ELISA Kit 96T/48T
00112 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒  Human apoptosis protease activating factor-1，Apaf-1 ELISA Kit 96T/48T
00113 人中期因子(MK)ELISA試劑盒 Human Midkine，MK ELISA Kit 96T/48T
00114 人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Human B-cell leukemia/lymphoma 2，Bcl-2 ELISA Kit  96T/48T
00115 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Human hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
00116 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit 96T/48T
00117 人P53(P53)ELISA試劑盒 Human p53/tumor protein， p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T
00118 人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒 Human Endostatin，ES ELISA Kit  96T/48T
00119 人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 Human ferritin，F(xiàn)E ELISA Kit 96T/48T
00120 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
00121 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒 Human myelin basic protein autoantibody，MBP ELISA Kit 96T/48T
00122 人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit 96T/48T
00123 人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒 human lung cancer Marker ELISA Kit 96T/48T
00124 人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒 human gastric carcinoma Marker ELISA Kit 96T/48T
00125 人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒 Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 96T/48T
00126 人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 96T/48T
00127 人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 96T/48T
00128 人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒 Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 96T/48T
00129 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit 96T/48T
00130 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit 96T/48T
00131 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit 96T/48T
00132 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit 96T/48T
00133 人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit  96T/48T
00134 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒  Human Surfactant Protein A，SP-A ELISA Kit 96T/48T
00135 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 Human Pulmonary surfatcant-associated protein A，SP-A ELISA Kit 96T/48T
00136 人轉(zhuǎn)*酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒 human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit 96T/48T
00137 人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide，PⅠNP ELISA Kit兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 96T/48T
00138 人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit 96T/48T
00139 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human C-opeptide of type Ⅰ collagen，CTX-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
00140 人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 Human hepatic lipase，HL ELISA Kit 96T/48T
00141 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 Human Heparanase，HPA ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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