兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

00001 人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒  Human Interleukin-2 receptor，IL-2R ELISA Kit 96T/48T
00002 人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 Human Interferon β，IFN-β/IFNB ELISA Kit  96T/48T
00003 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒  Human transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit  96T/48T
00004 人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 Human leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit 96T/48T
00005 人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒  Human growth hormone relasing factor，GH-RF ELISA Kit 96T/48T
00006 人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒  Human macrophage chemotatic factor，MCF ELISA Kit 96T/48T
00007 人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒  Human Interferon α/βReceptor，IFN-α/βR ELISA Kit 96T/48T
00008 人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒  Human B cell growth protein，BCGF ELISA Kit 96T/48T
00009 人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒  Human B cell differetiation factor，BCDF ELISA Kit 96T/48T
00010 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒  Human soluble adhesion molecules，Sam ELISA Kit 96T/48T
00011 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 Human Perforin/Pore-forming protein，PF/PFP ELISA Kit 96T/48T
00012 人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA試劑盒 Human pleiotrophin，PTN ELISA Kit 96T/48T
00013 人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒 Human lymphocyte factor ELISA Kit 96T/48T
00014 人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒  Human Cobra venom neuronal protective factor，CVNPF ELISA Kit 96T/48T
00015 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒 Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor，sTNFαR ELISA Kit 96T/48T
00016 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒 Human soluble cytokine receptor，sCKR ELISA Kit 96T/48T
00017 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒 Human colony-stimulating factor，CSF ELISA Kit 96T/48T
00018 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 Human apoptosis inducing factor，AIF ELISA Kit 96T/48T
00019 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒 Human Placenta Cadherin，P-cad ELISA Kit 96T/48T
00020 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 Human Keratinocyte Growth Factor，KGF ELISA Kit 96T/48T
00021 人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 Human Plaet-Derived Growth Factor-BB，PDGF-BB ELISA Kit  96T/48T
00022 人淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒 Human lymphotactin，Lptn/LTN ELISA Kit 96T/48T
00023 人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Human Interferon α，IFN-α ELISA Kit 96T/48T
00024 人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 human Interleukin 27，IL-27 ELISA Kit  96T/48T
00025 人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 Human Interleukin 23，IL-23 ELISA Kit  96T/48T
00026 人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 Human Interleukin 1，IL-1 ELISA Kit 96T/48T
00027 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Human Interleukin 17，IL-17 ELISA Kit  96T/48T
00028 人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 Human Interleukin 1β，IL-1β ELISA Kit  96T/48T
00029 人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 Human Epidermal growth factor，EGF ELISA Kit  96T/48T
00030 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒 Human basic fibroblast growth factor，bFGF ELISA Kit  96T/48T
00031 人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 Human soluble E-selectin，sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
00032 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1，sICAM-1 ELISA Kit  96T/48T
00033 人細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 Human intercellular adhesion molecule 2，ICAM-2 ELISA Kit 96T/48T
00034 人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 Human intercellular adhesion molecule 3，ICAM-3 ELISA Kit  96T/48T
00035 人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 Human Interleukin 18，IL-18 ELISA Kit  96T/48T
00036 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒  Human mucosae associated epithelia chemokine，MEC ELISA Kit 96T/48T
00037 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B，VEGF-B ELISA Kit  96T/48T
00038 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒  Human Vascular Endothelial cell Growth Factor，VEGF ELISA Kit  96T/48T
00039 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒  Human Vascuolar cell adhesion molecule 1，VCAM-1 ELISA Kit  96T/48T
00040 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 Human Tumor necrosis factor β，TNF-β ELISA Kit  96T/48T
00041 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒  Human Tumor necrosis factor α，TNF-α ELISA Kit  96T/48T
00042 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 Human Transforming Growth factor β1，TGF-β1 ELISA Kit  96T/48T
00043 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Human transforming growth factor α，TGF-α ELISA Kit 96T/48T
00044 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 Human Stem cell factor/mast cell growth factor，SCF/MGF ELISA Kit  96T/48T
00045 人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒  Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand，sCD40L ELISA Kit  96T/48T
00046 人可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒  Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand，sCD30L ELISA Kit  96T/48T
00047 人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒 Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISA Kit  96T/48T
00048 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 Human Plaet-Derived Growth兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Factor AB，PDGF-AB ELISA Kit  96T/48T
00049 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 Human Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α，PDGFsR-α ELISA Kit  96T/48T
00050 人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 Human Macrophage-Derived Chemokine，MDC ELISA Kit  96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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