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上海紀寧酶聯科技有限公司
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閱讀:287發(fā)布時間:2014-10-14
牛γ干擾素(IFN-γ)樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
牛γ干擾素(IFN-γ操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L ,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
E-(Bo)(01)-00006 牛巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒 ,英文名: macrophage chemotatic factor,MCF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00007 牛α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒 ,英文名: Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00008 牛B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒 ,英文名: B cell growth protein,BCGF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00009 牛B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 ,英文名: B cell differetiation factor,BCDF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00010 ??扇苄哉掣椒肿?Sam)ELISA試劑盒 ,英文名: soluble adhesion molecules,Sam ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00011 牛穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 ,英文名: Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00012 牛多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒 ,英文名: pleiotrophin,PTN ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00013 牛淋巴細胞因子ELISA試劑盒 ,英文名: lymphocyte factor ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00014 牛神經保護因子(CVNPF)ELISA試劑盒 ,英文名: Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00015 ??扇苄阅[瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒 ,英文名: soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00016 牛可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒 ,英文名: soluble cytokine receptor,sCKR ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00017 牛集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒 ,英文名: colony-stimulating factor,CSF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00018 牛凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 ,英文名: apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00019 牛P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒 ,英文名: Placenta Cadherin,P-cad ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00020 牛角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒 ,英文名: KeRatinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00021 牛血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: Plaet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
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