人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒 Human apoptosis protease activating factor-1，Apaf-1 ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T，產(chǎn)品別名： 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)檢測(cè)試劑盒
人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒原理的簡(jiǎn)要說(shuō)明書(shū)：凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)是線粒體凋亡途徑中的重要因子.Apaf-1導(dǎo)致凋亡體的形成,然后激活caspase-9水解.激活的caspase-9能使caspase的下游信號(hào)開(kāi)放執(zhí)行細(xì)胞程序性死亡。
人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒 操作方法一：
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒操作方法二：
間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；
4.（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌；
6.’zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
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