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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司


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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的方法測抗原

閱讀：248發(fā)布時(shí)間：2015-8-10

    根據(jù)試劑的來源和樣本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。ELISA試劑盒以下主要介紹幾種公司常用的檢測抗原的類型：

    樣本中的待測藥物和固相化的抗原共同競爭一定量的抗體，加入酶標(biāo)記抗抗體（酶標(biāo)二抗）后能與固相化的抗原抗體復(fù)合物特異性結(jié)合，經(jīng)底物顯色后檢測，樣本中藥物含量愈高，競爭結(jié)合的抗體量愈多，從而結(jié)合在固相上的酶標(biāo)記抗抗體（酶標(biāo)二抗）量愈少，zui后的顯色也愈淺。本公司及國內(nèi)產(chǎn)品多用此法。

具體操作步驟如下：

1）抗原固相化：將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

2）加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，再加入抗體，保溫反應(yīng)。ELISA試劑盒樣本中藥物與固相抗原同時(shí)競爭與特異性抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去游離物質(zhì)及吸附在固相載體上結(jié)合不緊密的物質(zhì)。
3）加酶標(biāo)抗抗體，固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢藥物的量負(fù)相關(guān)。
4）加底物顯色，固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。ELISA試劑盒通過儀器檢測分析，測知樣本中抗原的量。


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