1．效價(jià)測定：采用間接ELISA 測定OLApAb 效價(jià)，基本程序參照Tijssen的方法。
（1） *步，包被。用包被原OLA-OVA 包被96 孔酶標(biāo)板，包被濃度為0.4μg/mL，包被量為每孔100μL，37℃溫育2h，PBST 洗板6 次并拍干（下同）；
（2） 第二步，封閉。用5%豬血清封閉，每孔200μL，37℃溫育1h，洗板；
（3） 第三步，加多抗血清。將采出來的多抗血清先用PBS 稀釋200 倍，每孔50μL，用封閉液倍比稀釋，設(shè)陰性對照（NC）和空白對照（BC），37℃溫育20min，洗板；
（4） 第四步，加GaMIgG-HRP。將GaMIgG-HRP 用封閉液稀釋1000 倍，每孔50μL，37℃溫育30min，洗板；
（5） 第五步，顯色。加酶底物TMB，每孔50μL，室溫反應(yīng)5min；
（6） 第六步，終止顯色反應(yīng)。每孔加入終止液50μL，用酶標(biāo)儀讀OD450 值；
（7） 第七步， 結(jié)果判斷。以待測孔OD450 值≥NC OD450 值的2.1 倍（P/N≥2.1），判斷為陽性。
2．敏感性測定：采用間接競爭ELISA試劑盒 鑒定其敏感性。間接競爭ELISA 測定抗血清對OLA 的半數(shù)抑制濃度（IC50），并以IC50 作為敏感度。其操作步驟與間接ELISA 的區(qū)別在于第三步先加入不同濃度的OLA 溶液各50μL 作為抑制劑，再加入OD450 值zui接近1.0 的稀釋過的小鼠血清50μL。
3．特異性測定：采用交叉反應(yīng)試驗(yàn)鑒定其特異性。交叉反應(yīng)試驗(yàn)選擇OLA及卡巴氧、乙酰甲喹、*、噁喹酸等為競爭物，用間接競爭ELISA 測定各競爭物的IC50，以pAb 對OLA 的IC50 與各競爭物的IC50 之比的百分?jǐn)?shù)為其交叉反應(yīng)率（CR%）。
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