人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒廠家
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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2019-02-15 16:43:32瀏覽次數(shù):518次
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人anti-SurvivinElisa Kit檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
人anti-SurvivinElisa KitHuman anti-Survivin ELISA Kit
Survivin是凋亡抑制蛋白(Inhibitorofapoptosis,IAP)家族的新成員,是目前發(fā)現(xiàn)強的凋亡抑制因子,Survivin功能復(fù)雜,具有抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化并且參與細(xì)胞的有絲分裂、血管的生成和腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生等作用。Survivin基因全長15 KB,定位于17q25,含4個外顯子和3個內(nèi)含子,Survivin基因編碼產(chǎn)物是由142個氨基酸組成的蛋白,分子量16.2 KD。人鼠蛋白同源性為84.3%。與IAP家族的其他成員相比較,Survivin結(jié)構(gòu)特殊,IAP家族一般含有2個-3個串聯(lián)的含有半*/*共有序列在內(nèi)的70個氨基酸組成的桿狀病毒凋亡抑制蛋白重復(fù)系列(baculovirus IAP repeat,BIR)分子以及羥基末端環(huán)指結(jié)構(gòu),其中的BIR分子發(fā)揮抗凋亡作用,而Survivin僅含有一個單一的BIR功能區(qū),并由Cys46Pro47Thr483個氨基酸插入序列將Survivin分為兩半,羥基端不含有環(huán)指結(jié)構(gòu),代以交織螺旋結(jié)構(gòu)(coiledcoil),以區(qū)別于其他IAP家族成員。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 人anti-SurvivinElisa Kit |
英文名稱 | Human anti-Survivin ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑準(zhǔn)備:
1. 人anti-SurvivinElisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。?
樣本處理及要求:
1. 人anti-SurvivinElisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司采用人anti-SurvivinElisa Kit的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
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Sodium Phosphate Buffer(磷酸鈉緩沖液),0.2M,pH7.5 常溫保存Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH7.5 現(xiàn)貨供應(yīng)
Sodium Phosphate Buffer(磷酸鈉緩沖液),0.2M,pH7.6 常溫保存Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH7.6 現(xiàn)貨供應(yīng)
Sodium Phosphate Buffer(磷酸鈉緩沖液),0.2M,pH8.0 常溫保存Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0 現(xiàn)貨供應(yīng)
Sodium Phosphate Buffer(磷酸鈉緩沖液),0.2M,pH8.5 常溫保存Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.5 現(xiàn)貨供應(yīng)
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