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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2019-02-15 17:44:01瀏覽次數(shù):445次
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人SurvivinElisa Kit檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
人SurvivinElisa KitHuman Survivin ELISA Kit
Survivin是凋亡抑制蛋白(Inhibitorofapoptosis,IAP)家族的新成員,是目前發(fā)現(xiàn)強的凋亡抑制因子,Survivin功能復(fù)雜,具有抑制細胞凋亡,促進細胞轉(zhuǎn)化并且參與細胞的有絲分裂、血管的生成和腫瘤細胞耐藥性的產(chǎn)生等作用。Survivin基因全長15 KB,定位于17q25,含4個外顯子和3個內(nèi)含子,Survivin基因編碼產(chǎn)物是由142個氨基酸組成的蛋白,分子量16.2 KD。人鼠蛋白同源性為84.3%。與IAP家族的其他成員相比較,Survivin結(jié)構(gòu)特殊,IAP家族一般含有2個-3個串聯(lián)的含有半*/*共有序列在內(nèi)的70個氨基酸組成的桿狀病毒凋亡抑制蛋白重復(fù)系列(baculovirus IAP repeat,BIR)分子以及羥基末端環(huán)指結(jié)構(gòu),其中的BIR分子發(fā)揮抗凋亡作用,而Survivin僅含有一個單一的BIR功能區(qū),并由Cys46Pro47Thr483個氨基酸插入序列將Survivin分為兩半,羥基端不含有環(huán)指結(jié)構(gòu),代以交織螺旋結(jié)構(gòu)(coiledcoil),以區(qū)別于其他IAP家族成員。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 人SurvivinElisa Kit |
英文名稱 | Human Survivin ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑準備:
1. 人SurvivinElisa Kit使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。?
樣本處理及要求:
1. 人SurvivinElisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司采用人SurvivinElisa Kit的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
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