增殖細胞核抗原抗體2

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更新時間：2016-01-28 08:26:05瀏覽次數(shù)：209次

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上海撫生實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

增殖細胞核抗原抗體2經(jīng)過*實踐已經(jīng)發(fā)展的相當成熟，在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。

詳細介紹

增殖細胞核抗原抗體2動物體內單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動物體內單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得，因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內，在小鼠腹腔內生長雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟，不過，腹水中?；煊行∈蟮母鞣N雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動物病毒的危險，故而用SPF級小鼠。 增殖細胞核抗原抗體2A、材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細胞。
B、方法：a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時，皮膚有緊張感，即可用16號針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d. 將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測定抗體效價，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆?，或凍干保存?br /> 公司產(chǎn)品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊：HP Tissue DNA Maxi Kit（2） 180
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體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進行單層細胞培養(yǎng)，又可以進行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細胞的單層細胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段，即將雜交瘤細胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進行雜交瘤細胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內細胞數(shù)量越多，細胞存活時間越長，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。