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更新時(shí)間:2016-03-02 14:47:04瀏覽次數(shù):399次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 智慧城市網(wǎng)胃泌素/蛙皮素經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。
胃泌素/蛙皮素 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中?;煊行∈蟮母鞣N雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。 胃泌素/蛙皮素
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆?,或凍干保存?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: Human C-opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
Human gastrin receptor,GsaR 人促胃液素受體(GsaR)
Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)
Human trypsinogen activation peptide,TAP 人*原激活肽(TAP)ELISA
Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)
Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)
Human malondialchehyche,MDA 人丙二醛(MDA)
Human Amylin 人胰淀素(Amylin)
Human Motilin,MTL 人血管活性腸肽(VIP)
Human cholecystokinin,CCK 人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)
Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ 人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ 人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
Human Hyaluronic acid,HA 人透明質(zhì)酸(HA)
Human Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
Human Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ 人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
Human Laminin,LN 人層連蛋白/板層素(LN)
Human Fibronectin,FN 人纖連蛋白(FN)
Human Fibronectin,FN 人纖連蛋白(FN)
Human anti-Nogo-A antibody,NOGO-A Ab 人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
Human Anti-tissue tranGSlutaminase IgA,tTG-IgA 人抗組織轉(zhuǎn)*酶抗體IgA(tTG-IgA)
Human anti-Survivin antibody,Surv 人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)
Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)
Human Anti-titin Antibody,TTN 人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)
(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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