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更新時(shí)間:2016-02-28 22:36:29瀏覽次數(shù):348次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 智慧城市網(wǎng)DNA裂解因子抗體主要是將有效抗原注入人體或動(dòng)物,由人或動(dòng)物體內(nèi)的B細(xì)胞產(chǎn)生抗體
DNA裂解因子抗體動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高??梢娫摲ú僮骱啽?、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中?;煊行∈蟮母鞣N雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。 DNA裂解因子抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: Mouse soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)
Mouse Hyaluronic acid,HA 小鼠透明質(zhì)酸(HA)
Mouse ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)
Mouse Cholecystokinin,CCK 小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)
Mouse brain-gut peptides,BGP/Gehrelin 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)
Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)
Mouse apoprotein,apo-A1 小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)
Mouse apoprotein B100,apo-B100 小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)
Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 小鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)
Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
Mouse Vitamin C,VC 小鼠*(VC)
Mouse Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ 小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
Mouse Vitamin B6,VB6 小鼠*6(VB6)
Mouse Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
Mouse soluble P-selectin,sP-selectin 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)
(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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