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撫生試劑-培養(yǎng)細(xì)胞操作

閱讀:211發(fā)布時間:2014-6-12

                           培養(yǎng)細(xì)胞操作

    人和動物體內(nèi)絕大部分組織都可以在體外培養(yǎng),但其難易程度與組織類型、分化程度、供體的年齡、原代培養(yǎng)方法等有直接關(guān)系,原代取材是進(jìn)行組織培養(yǎng)的*步。

  取材的基本要求

   (1)取材的組織盡快培養(yǎng)。因故不能即時培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4度冰箱中。如果組織塊很大,應(yīng)先將其切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。

   (2)取材時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,用無菌包裝的器皿或用事先消毒好的,帶少許培養(yǎng)液的小瓶等便于攜帶的物品取材,取材過程中要盡量避免紫外線照射和接觸化學(xué)試劑如碘、汞等。從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材時,為減少污染,可用含500~1000單位/ml的青*BSS液漂洗5~10min,或用10%*注射液沖洗浸泡10min再做培養(yǎng).

   (3)取材和原代培養(yǎng)時,要用鋒利的器械如刮臉刀片切碎組織,盡可能減少對細(xì)胞的機械損傷.

   (4)對于血液.脂肪.神經(jīng)組織.結(jié)締組織和 壞死組織,取材時要細(xì)心出去,修剪和切碎過程中,為避免組織干燥,可將其浸泡于少量培養(yǎng)液中.

   (5)原代培養(yǎng),特別是正常細(xì)胞的培養(yǎng),應(yīng)采用營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)液,添加胎牛血清,含量為10%~20%為宜.

   (6)一般來講,胚胎組織較成熟個體的組織容易培養(yǎng),分化底的較分化高的組織容易生長,腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng).如無特殊要求,可采用易培養(yǎng)的組織進(jìn)行培養(yǎng),成功率較高.


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