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閱讀:514發(fā)布時間:2018-7-24
口ELISA試劑盒價格摘要:近年來,基因工程技術(shù)發(fā)展迅速,許多重組蛋白得以表達。其中利用植物生物反應(yīng)器表達特異藥物蛋白為人類一些重要疾病的預(yù)防和治療提供了新途徑。植物葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化和表達系統(tǒng)成為目前植物生物反應(yīng)器的研究熱點。因結(jié)構(gòu)和遺傳上的特殊性,高等植物葉綠體在重組蛋白表達方面具有*優(yōu)勢,外源基因表達量高、定點整合,而且葉綠體母系遺傳特性保證了生物安全性。
很多重要藥用蛋白質(zhì)在植物葉綠體中表達成功。煙草作為高等植物葉綠體轉(zhuǎn)化模式植物,在疫苗抗原、抗體等藥物蛋白和其他重要重組蛋白表達方面取得顯著進展。高等植物葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化也為葉綠體基因的表達和調(diào)控機制的研究提供新的技術(shù)和方法。
文中從葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化原理、載體構(gòu)建、重組蛋白和重要藥物蛋白在葉綠體中的表達以及重組蛋白表達對植物代謝和性狀影響等多個角度,對高等植物葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化體系研究的新進展進行了綜述,以期為葉綠體表達平臺的開發(fā)和重要藥用蛋白質(zhì)的表達提供新思路。
近年來,隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)日漸成熟,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)表達重要重組蛋白的研究愈發(fā)受到關(guān)注。傳統(tǒng)的重組蛋白表達系統(tǒng)主要有大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞以及昆蟲細胞等。每種表達系統(tǒng)都有各自的優(yōu)點,如大腸桿菌和酵母的遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單;昆蟲細胞可用于真核蛋白表達;哺乳動物細胞表達的重組蛋白接近天然蛋白。但仍有一些限制因素阻礙著這些表達系統(tǒng)的開發(fā)和商業(yè)化應(yīng)用,譬如重組蛋白及后期純化成本高、效率低,重組蛋白的穩(wěn)定性和安全性問題也難以保證。植物葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化和表達體系是近年發(fā)展起來的一種新的重組蛋白表達系統(tǒng)。與植物細胞核表達平臺相比具有一些明顯優(yōu)勢:1)葉綠體基因組拷貝數(shù)多,外源基因表達效率高;2)母系遺傳,外源基因不會隨花粉傳播而逃逸,生物環(huán)境安全性高;3)葉綠體基因組含有多順反子結(jié)構(gòu),多基因可共同表達;4)葉綠體由雙層膜包裹且無蛋白外流,為重組蛋白表達提供了一個相對安全的生物環(huán)境。
目前為止,高等植物遺傳轉(zhuǎn)化和表達體系已取得豐碩的研究進展和成果。2012年,F(xiàn)DA(U.S. Food and Drug Administration)批準Protalix公司以胡蘿卜細胞的、用于治療戈謝病的ELELYSOTM (Taliglucerase alfa)藥物正式上市。這是*用植物細胞作為生物反應(yīng)器并獲得FDA認可的藥物。植物葉綠體在疫苗抗原、工業(yè)酶等重要重組蛋白和生物燃料方面也取得了顯著成就,尤其是某些重組蛋白能提高植物對非生物壓力的承受力,這對植物在逆境下生長具有重要意義。
為使葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化與表達體系更加適應(yīng)商業(yè)化模式,基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、植物細胞凍干法、核糖體圖譜和質(zhì)譜技術(shù)等多種研究手段應(yīng)用于葉綠體表達系統(tǒng)的開發(fā)研究。其中凍干植物細胞可在常溫下貯存數(shù)月而不失重組蛋白活性,簡化了發(fā)酵、提取、純化、低溫運輸、制備等工藝,有效降低了成本。
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