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　　醫(yī)學(xué)科學(xué)家的重大發(fā)現(xiàn)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)系1．哈維（WilliamHarvery,1578～1657）英國(guó)醫(yī)生，實(shí)驗(yàn)生理學(xué)的創(chuàng)始人之一。他采用狗、蛙、蛇、魚(yú)、蟹和其他動(dòng)物進(jìn)行了一系列動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)了血液循環(huán)，證實(shí)了動(dòng)物體內(nèi)的血液循環(huán)現(xiàn)象，并闡明了心臟在此過(guò)程中的作用，指出血液受心臟推動(dòng)，沿動(dòng)脈流向全身各部，再沿靜脈返回心臟，環(huán)流不息，他還測(cè)定過(guò)心臟每搏輸出量。1628年發(fā)表《動(dòng)物心血運(yùn)動(dòng)的解剖研究》，1651年發(fā)表《論動(dòng)物的生殖》，這些成就對(duì)生理學(xué)和胚胎學(xué)的發(fā)展起了很大作用。恩格斯對(duì)哈維的發(fā)現(xiàn)給予了高度的評(píng)價(jià)，曾說(shuō)：“由于哈維發(fā)現(xiàn)血液循環(huán)，而把生理學(xué)確定為一門(mén)科學(xué)。”
　　
　　2．科赫（RobertKoch,1843～1910）德國(guó)細(xì)菌學(xué)家。他采用牛、羊和其他動(dòng)物作實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了結(jié)核地菌。他發(fā)明用固體培養(yǎng)基的“細(xì)菌純培養(yǎng)法”，首先采用染色體觀察細(xì)菌的形態(tài)，并運(yùn)用這些方法，分離出炭疽桿菌、結(jié)核桿菌和霍亂桿菌，同時(shí)確證這些細(xì)菌與疾病的關(guān)系，提出了“科赫原則”，作為判斷某種微生物是否為某種疾病的病原的準(zhǔn)則，1905年獲諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。
　　
　　3．巴斯德（LouisPasteur,1822～1895）法國(guó)微生物學(xué)家、化學(xué)家、近代微生物學(xué)的奠基人。他在病原微生物方面的研究，奠定了醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的基礎(chǔ)。在研究蠶病，雞霍亂和炭疽病中，證實(shí)傳染病是由病原微生物所引起。采用鳥(niǎo)類作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)被減毒的雞霍亂和炭疽病原菌能誘發(fā)免疫性。晚年在鳥(niǎo)和家兔上進(jìn)行狂犬病疫苗的研究，對(duì)狂犬病免疫作出了很大貢獻(xiàn)。他在研究炭疽病中，證實(shí)傳染病是由病原微生物所引起的，其中有一個(gè)生動(dòng)的事例。巴斯德很想知道有的地方為什么不斷發(fā)生炭疽病，而且總是發(fā)生在同樣的田野里，有時(shí)相隔數(shù)年之久。巴斯德從埋了十二年之久，死于炭疽病的羊尸體周?chē)寥乐?，分離出這種病菌。他奇怪這種有機(jī)體為什么能這樣長(zhǎng)時(shí)間地抗拒日照以及其他不利因素。一天巴斯德在地里散步時(shí)，發(fā)現(xiàn)一塊土壤與周?chē)伾煌?，遂?qǐng)教農(nóng)民。農(nóng)民告訴他說(shuō)，前一年這里埋了幾只死于炭疽病的的羊。一向細(xì)心觀察事物的巴斯德注意到土壤表層有大量蚯蚓帶出的土粒。于是他想到蚯蚓來(lái)回不斷從土壤深處爬到表層，就把羊尸體周?chē)挥懈迟|(zhì)的泥土以及泥土中含有的炭疽病芽胞帶到表層。巴期德從不止步于設(shè)想，他立刻進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了他的預(yù)見(jiàn)。接種了蚯蚓所帶泥土的豚鼠得了炭疽病。
　　
　　4．巴甫洛夫（ИBaHΠeTpOBчhΠaBлOB,1948～1936）俄國(guó)生理學(xué)家，他一生作了大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，在心臟生理、消化生理和神經(jīng)活動(dòng)三個(gè)方面作出了重大貢獻(xiàn)。早年發(fā)現(xiàn)溫血?jiǎng)游镄呐K有特殊的營(yíng)養(yǎng)性神經(jīng)，能使心臟增強(qiáng)或減弱。在消化腺的研究中，他在狗身上創(chuàng)造了許多*，改進(jìn)了實(shí)驗(yàn)方法，以慢性實(shí)驗(yàn)代替了急性實(shí)驗(yàn)，從而能夠長(zhǎng)期地觀察整體動(dòng)物的正常生理過(guò)程，在研究消化生理過(guò)程中，形成了條件反射的概念，從而開(kāi)辟了神經(jīng)活動(dòng)生理學(xué)研究，他的神經(jīng)活動(dòng)學(xué)說(shuō)對(duì)于醫(yī)學(xué)、心理學(xué)以及哲學(xué)等方面都有很大影響。1904年獲諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，著有《動(dòng)物神經(jīng)活動(dòng)（行為）客觀研究二十年經(jīng)驗(yàn)》等著作。由于他在研究中經(jīng)常不斷地使用狗作研究對(duì)象，因此他的一些著作也以狗來(lái)命名，如《狗的血壓的正常變動(dòng)范圍》、《狗的心臟的神經(jīng)支配》等。他對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)給予了高度的評(píng)價(jià)，如說(shuō)“沒(méi)有對(duì)活動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)和觀察，人們就無(wú)法認(rèn)識(shí)有機(jī)界的各種規(guī)律，這是無(wú)可爭(zhēng)辯的。”他對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用和習(xí)性也很了解，有很多精辟的論述，如他說(shuō)“狗由于素來(lái)對(duì)人好感，由于它的機(jī)敏、耐性以及馴順而十分愉快地為實(shí)驗(yàn)者服務(wù)許多年，甚至終身。”“只有當(dāng)必需才用貓作實(shí)驗(yàn)，因?yàn)檫@種動(dòng)物性情急燥，本性兇惡，善叫。”“除了狗以外，家兔是zui常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，因?yàn)樗且环N馴順而活潑的動(dòng)物，而且很少尖叫與反抗”。
　　
　　醫(yī)學(xué)科學(xué)家的重大發(fā)現(xiàn)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)系5．貝爾納（ClaudeBernard,1813～1878）法國(guó)生理學(xué)家，他的zui重要的發(fā)現(xiàn)為肝臟的產(chǎn)糖功能和血管運(yùn)動(dòng)神經(jīng)。他觀察到刺激第四腦室底部能使動(dòng)物發(fā)生暫時(shí)性的糖尿癥，表明身體內(nèi)糖的產(chǎn)生是受中樞神經(jīng)系統(tǒng)控制的。胰液能分解中性脂肪的功能和美洲箭毒能麻痹骨骼肌肉的作用機(jī)制也是他發(fā)現(xiàn)的。他區(qū)別有機(jī)體的外環(huán)境和內(nèi)環(huán)境，他所指的內(nèi)環(huán)境主要是血液。認(rèn)為盡管外環(huán)境不斷變化，內(nèi)環(huán)境卻保持恒定是生命的保證，這個(gè)概念啟發(fā)了后來(lái)生理學(xué)的許多的研究。貝爾納在上述一些重大發(fā)現(xiàn)中，作了大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，其中有幾個(gè)典型例子，如貝爾納要根據(jù)沖動(dòng)沿交感神經(jīng)傳導(dǎo)并引起化學(xué)變化從而在皮膚中生熱的假說(shuō)，切斷了家兔頸部的交感神經(jīng)，希望導(dǎo)致兔耳變涼。使他吃驚的是：該側(cè)的耳朵卻變得更熱了。貝爾納將耳血管與通常使耳血管保持適當(dāng)收縮的神經(jīng)作用彼此脫離了，結(jié)果血液流量增大，耳朵變熱。貝爾納起初并沒(méi)有認(rèn)識(shí)到自己的所作所為，他*偶然地發(fā)現(xiàn)了動(dòng)脈中的血流量是由神經(jīng)控制這一事實(shí)，這是自哈維經(jīng)典性的發(fā)現(xiàn)以后，人類對(duì)血液循環(huán)認(rèn)識(shí)zui重要的進(jìn)展之一。又如，有一天，別人給貝爾納的實(shí)驗(yàn)室送來(lái)了幾只從市場(chǎng)上買(mǎi)來(lái)的兔子。貝爾注意到實(shí)驗(yàn)桌上兔子排的尿清亮而帶酸性，不象尋常草食動(dòng)物那樣混濁而帶堿性。他推斷，這多半是由于沒(méi)有喂食，兔子從自己身體的組織中吸取養(yǎng)份，因而處于食肉動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)狀況。他用喂養(yǎng)和禁食互相交替的方法證實(shí)了這個(gè)觀點(diǎn)，這種作用過(guò)程果然使兔尿反應(yīng)發(fā)生了預(yù)期的變化。這是一次精彩的觀察，多數(shù)研究人員也就心滿意足了，但貝爾納卻不然。他要求“反證”，于是用肉食喂兔子，果然不出所料，兔尿呈酸性，貝爾納為完成這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，zui后對(duì)兔子作了解剖。用他自己的話說(shuō)“我偶然注意到白色乳狀的淋巴液初見(jiàn)于離幽門(mén)約三十厘米處十二指腸下部的小腸中。這引起了我的注意，因?yàn)樵诠返纳砩狭馨鸵撼跻?jiàn)于十二指腸的上部緊靠近幽門(mén)的地方。”再仔細(xì)觀察，他看到胰導(dǎo)管的開(kāi)口是與淋巴液開(kāi)始含有白色乳糜的位置一致，脂肪質(zhì)的乳狀液使這種乳糜成為白色，這樣就發(fā)現(xiàn)了胰液在脂肪消化中的作用。
　　
　　6．萊夫勒（FriedrichLoffler,1852～1915）德國(guó)細(xì)菌學(xué)家，在白喉研究的早期，證明了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物因注射白喉?xiàng)U菌而死亡時(shí)，細(xì)菌仍留在注射點(diǎn)的附近。他認(rèn)為動(dòng)物死亡是由細(xì)菌的毒素所造成。根據(jù)這一假說(shuō)，魯（EmileRoux,1853～1933法國(guó)細(xì)菌學(xué)家、醫(yī)生）做了大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，企圖證實(shí)細(xì)菌培養(yǎng)液中的這種毒素，雖做了很多努力，卻都失敗了。盡管如此，魯仍堅(jiān)信這一假說(shuō)，zui后孤注一擲，給豚鼠注射了35毫升的大劑量培養(yǎng)液濾液，奇怪的是，這只豚鼠在注射了如此大劑量的液體居然沒(méi)有立即死亡，過(guò)了一些時(shí)候，他滿意地看到這只豚鼠死于白喉中毒。確認(rèn)了這點(diǎn)以后，魯很快就查明，這只豚鼠開(kāi)始只所以不死是因?yàn)榕囵B(yǎng)液中細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間不夠長(zhǎng)，產(chǎn)生的毒素不足所致。因而，增加細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間就能夠制成毒性很大的濾液，這一發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致了預(yù)防白喉的免疫法，并使抗血清用于治療（1890年VonBehring發(fā)現(xiàn)患白喉病愈后豚鼠的血清中含有某種物質(zhì)，可以保護(hù)其他豚鼠），從而開(kāi)始了抗毒素治療的新的時(shí)代。
　　
　　7．馮梅林（BaronJosephVonMering,1849-1908）德國(guó)內(nèi)科醫(yī)生，閔可夫斯基（OscarMinkowsk,1858～1931），出生于俄國(guó)的內(nèi)科醫(yī)學(xué)、病理學(xué)家。1889年在斯*堡研究胰臟在消化過(guò)程中的功能時(shí)，用手術(shù)切除了一個(gè)狗的胰臟。過(guò)后，一個(gè)實(shí)驗(yàn)助手發(fā)現(xiàn)這只狗的尿招來(lái)了成群的蒼蠅。他將些事報(bào)告給了閔可夫斯基，經(jīng)分析尿后發(fā)現(xiàn)其中有糖。正是這一發(fā)現(xiàn)，使我們認(rèn)識(shí)了糖尿病和后來(lái)用胰島素控制糖尿病的方法。胰島素是由Banting和Best二氏從家犬體內(nèi)分離出的，這一發(fā)現(xiàn)拯救了無(wú)數(shù)糠尿病患者的生命。
　　
　　8．里基特（CharlesRicet）法國(guó)生理學(xué)家，在用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)?？|手提取物，以測(cè)定其毒素劑量時(shí)，突然發(fā)現(xiàn)，與*次相隔一段時(shí)間第二次的微小劑量常使動(dòng)物迅速死亡。起先他對(duì)此大為震驚，簡(jiǎn)直不能相信這是他自己做出來(lái)的結(jié)果。確實(shí)，他說(shuō)過(guò)，他發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)敏感作用或稱過(guò)敏性*是不知不覺(jué)的，他原來(lái)認(rèn)為這是不可能的。這種過(guò)敏感現(xiàn)象的的另一表現(xiàn)是由戴爾（HenryDale）發(fā)現(xiàn)的。他在豚鼠的幾條不隨意肌內(nèi)注射血清時(shí)，突然發(fā)現(xiàn)有一條肌肉對(duì)馬血清反應(yīng)特別強(qiáng)烈。在尋找這一特別現(xiàn)象的原因時(shí)，他發(fā)現(xiàn)這只豚鼠在不久前曾注射過(guò)馬血清。由于前次已注射過(guò)馬血清（稱感應(yīng)劑量）使豚鼠對(duì)馬血清（異性蛋白）感受提高，因此第二次再注射馬血清（稱決定性劑量）時(shí)豚鼠可比*次注射反應(yīng)強(qiáng)烈得多。這證實(shí)了過(guò)敏的本質(zhì)是抗原抗體的反應(yīng)，從而推動(dòng)了變態(tài)反應(yīng)性疾病的研究。
　　
　　9．洛伊（OttoLoewi），格次茨大學(xué)藥物學(xué)教授。1921年，他以創(chuàng)造性的思維，僅采用簡(jiǎn)單的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，就發(fā)現(xiàn)了副交感神經(jīng)的神經(jīng)介質(zhì)為乙酰膽鹼。“次日他走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，以生物學(xué)歷*少有的利落、簡(jiǎn)單、肯定的實(shí)驗(yàn)證明了神經(jīng)沖動(dòng)的化學(xué)媒介作用。他準(zhǔn)備了兩只蛙心，用鹽水使其保持跳動(dòng)。他刺激一只蛙心的迷走神經(jīng)，使其停止跳動(dòng)。然后他把浸泡過(guò)這只蛙心的鹽水取出來(lái)浸泡第二只蛙心。洛伊滿意地看到：鹽水對(duì)第二只蛙心的作用，同刺激來(lái)迷走神經(jīng)對(duì)*只蛙心的作用相同：搏動(dòng)的肌肉停止了跳動(dòng)。這就是世界各國(guó)對(duì)化學(xué)媒介作用不僅在于神經(jīng)與它們影響肌肉和腺體之間，而且也存在于神經(jīng)單元本身之間。”
　　
　　10．其他一些著明科學(xué)家采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得重大發(fā)現(xiàn)的例子還很多，如：
　　
　　化學(xué)致癌物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)：1914年日本人山極和市川用瀝青長(zhǎng)期涂抹兔耳朵，成功地誘發(fā)出皮膚癌，后經(jīng)分析瀝青中主要含有3，4-苯駢芘的化學(xué)致癌物，從而證實(shí)了化學(xué)物質(zhì)的致癌作用。從此，許多化學(xué)物質(zhì)都相繼被證實(shí)可經(jīng)誘發(fā)動(dòng)物的腫瘤，為腫瘤病因的化學(xué)因素提供了更多的證據(jù)。使人們充分認(rèn)識(shí)到化學(xué)致癌因素在人類惡性腫瘤的病因中占有極重要的地位。現(xiàn)在已知的有致癌作用的化學(xué)物質(zhì)，種類繁多，分布廣泛。如3，4-苯駢芘、1，2，5，6-雙苯蒽、20-甲基膽蒽等多環(huán)碳?xì)浠衔铮粍?dòng)物實(shí)驗(yàn)證明是強(qiáng)烈的致癌物質(zhì)。用這些物質(zhì)涂抹動(dòng)物皮膚可引起皮膚癌，注射在動(dòng)物皮下則可引起肉癌。氨基偶氮染料，可引起動(dòng)物肝癌和膀胱癌。芳香胺類染料，可引起膀胱癌，其中芳香酰類（如N-2-乙酰氨基芴）可使多種動(dòng)物引起肝、腸、乳膜、外耳道、膀胱等不同部位的腫瘤。亞硝胺類化合生是一類分布廣，致癌性強(qiáng)，能引起多種動(dòng)物及多種器官發(fā)生腫瘤的天然存在的致癌物，甲基丙烯基亞硝胺等不對(duì)稱的亞硝胺主要引起食管癌；二乙基亞硝胺等對(duì)稱亞硝胺，主要引起肝癌；硝基烏拉坦能誘發(fā)大鼠的小腸、肝、腎、腦的腫瘤和胃的腺癌。
　　
　　英國(guó)內(nèi)科醫(yī)生、生理學(xué)家。在對(duì)離體的青蛙心臟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，生理學(xué)家通常使用生理鹽水作為灌液。用這種方法可使青蛙心臟繼續(xù)保持約半小時(shí)的跳動(dòng)。一次，在倫敦大學(xué)醫(yī)院，一位生理學(xué)家發(fā)現(xiàn)他的青蛙心臟連續(xù)跳動(dòng)了好幾個(gè)小時(shí)，他非常驚訝，大惑不解，他能想到的*可能原因是季節(jié)的影響，而這一點(diǎn)他也確實(shí)的報(bào)告中提出來(lái)了。后來(lái)，發(fā)現(xiàn)這是由于他的實(shí)驗(yàn)助手在制作鹽水溶液時(shí)用的不是蒸餾水而是自來(lái)水。根據(jù)這個(gè)線索斷定自來(lái)水中的某些鹽份引起了生理活動(dòng)的增加。林格就是這樣發(fā)現(xiàn)了這種以他名字命名的溶液。這種溶液對(duì)實(shí)驗(yàn)生理學(xué)的貢獻(xiàn)頗大。
　　
　　醫(yī)學(xué)科學(xué)家的重大發(fā)現(xiàn)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)系脾結(jié)節(jié)法測(cè)定多向造血干細(xì)胞方法的發(fā)現(xiàn)：1961年J.E.Till和E.A.McCulloch兩位加拿大血液學(xué)家在研究正常小鼠骨髓細(xì)胞放射敏感性時(shí)，對(duì)受致死劑量射線照射的小鼠移植一定數(shù)量的同種骨髓細(xì)胞后9～10天，取出脾臟，在苦味酸一甲醛固定液中固定后，可以肉眼見(jiàn)到脾臟表面上生成圓形結(jié)節(jié)。從而創(chuàng)立了脾結(jié)節(jié)法。同時(shí)他們進(jìn)一步觀察到脾結(jié)節(jié)的生成量與移植骨髓的有核細(xì)胞數(shù)之間呈比例關(guān)系，因此，可以作為評(píng)定骨髓細(xì)胞功能的一個(gè)重要測(cè)定方法，為測(cè)定造血細(xì)胞的功能提供了一個(gè)定量的研究方法，后來(lái)，進(jìn)一步的工作證明，脾結(jié)節(jié)的生成是起源于單一細(xì)胞的，這類細(xì)胞具有很強(qiáng)的增殖能力，同時(shí)又具有向骨髓紅系、粒系和巨核系細(xì)胞進(jìn)行分化的能力，符合了造血干細(xì)胞的基本特征，因而稱脾結(jié)節(jié)的生成細(xì)胞為多向性造血干細(xì)胞或多潛能性造血干細(xì)胞。因此脾結(jié)法是目前*的多向性造血干細(xì)胞的測(cè)定方法，它的發(fā)現(xiàn)大大促進(jìn)了血液學(xué)的研究。
　　
　　單克隆抗體技術(shù)的發(fā)明：雜交瘤（Hybidoma）合成單克隆抗體（Monoclonalantibodies）的近年來(lái)生物醫(yī)學(xué)中的一項(xiàng)重大突破。從根本上解決了免疫學(xué)中長(zhǎng)期存在的“特異性”和“重復(fù)性”問(wèn)題，顯出它的發(fā)展前途無(wú)可限zui。
　　
　　單克隆抗體技術(shù)是由英國(guó)劍橋大學(xué)兩位科學(xué)家G.Kohler和C.Milstein于1975年發(fā)明的，他們?cè)?0年代發(fā)展起來(lái)的細(xì)胞雜交技術(shù)基礎(chǔ)上，成功地把兩種細(xì)胞融合在一起，一種是已適應(yīng)體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（都來(lái)自BALB/C品系的小鼠）和一種經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)這種融合的雜交細(xì)胞兼有兩個(gè)親代細(xì)胞的特征，即既有骨髓細(xì)胞無(wú)限生長(zhǎng)的能力，又有漿細(xì)胞合成單一抗體的能力。因此，這種免疫細(xì)胞通過(guò)克隆化，成為單克隆系（單一純化的無(wú)性繁殖系），就能產(chǎn)生大量單一類型的高純度抗體，這種抗體就叫做“單克隆抗體”。如果把雜交細(xì)胞再種入動(dòng)脈體內(nèi)，可形成“雜交細(xì)胞瘤”瘤體產(chǎn)生大量抗體，就可從動(dòng)物體液中抽出含有單克隆抗體的體液，把這種雜交細(xì)胞在體外培養(yǎng)，培養(yǎng)液中就有大量的單克隆抗體，可供實(shí)驗(yàn)研究和臨床研究使用。zui近，在探索用于融合的人體漿細(xì)胞瘤方面已獲得成功，為單克隆抗體直接用于人類疾病的診斷、預(yù)防、治療以及發(fā)病機(jī)制的研究，特別是為人類惡性腫瘤的免疫診斷、*，開(kāi)辟了更為廣闊的前景。現(xiàn)在，單克隆抗體技術(shù)幾乎深入到生物醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，甚至滲入到過(guò)去認(rèn)為免疫血清學(xué)方法達(dá)不到的范疇，具有無(wú)法估量的作用。