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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:67發(fā)布時(shí)間:2016-11-29
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒組成及試劑配制
1.酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3.樣品稀釋液:1×20ml。
4.檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5.檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
6.檢測(cè)溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測(cè)溶液A加990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7.檢測(cè)溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11.覆膜:5張
12使用說(shuō)明書(shū):1份
標(biāo)本的采集及保存
1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4.樣本處理:血清或血漿標(biāo)本*稀釋5,000倍。
注:以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
丹參酮IIA-磺酸鈉 英文名稱: Tanshinone IIA-sulfonic sodium : 檢測(cè)方法及純度: UV≥98% 規(guī)格: 20mg/支
丹酚酸A 英文名稱: Salvianolic acid A : 96574-01-5 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
丹酚酸B 英文名稱: Salvianolic acid B : 115939-25-8 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
丹酚酸C 英文名稱: Salvianolic acid C : 115841-09-3 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
丹酚酸D 英文名稱: Salvianolic acid D : 142998-47-8 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
丹皮酚 英文名稱: Paeonol : 552-41-0 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
* 英文名稱: Cholesterol : 57-88-5 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 200mg/支
* 英文名稱: Bilirubin : 635-65-4 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
膽酸 英文名稱: Cholic acid : 81-25-4 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
DL-蛋氨酸(*) 英文名稱: DL-Methionin : 59-51-8 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 200mg/支
L-蛋氨酸(*) 英文名稱: L-Methionin : 63-68-3 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 200mg/支
黨參炔苷 英文名稱: Lobetyolin : 136085-37-5 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 10mg/支
α-倒捻子素 英文名稱: α-mangostin : CAS:6147-11-1 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
β-倒捻子素 英文名稱: β-mangostin : 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
* 英文名稱: Diosimin : 520-27-4 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
地膚子皂苷Ic 英文名稱: Momordin Ic : 96990-18-0 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
地榆皂苷I 英文名稱: Ziyuglycoside I : 35286-58-9 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
地榆皂苷II 英文名稱: Ziyuglycoside II : 35286-59-0 檢測(cè)方法及純度: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
ELISA試劑盒
商鋪:http://www.duty-free.cn/st58991/
主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒,水檢測(cè)試劑儀器,放免試劑盒,美國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)品,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,sigma原裝試劑,實(shí)驗(yàn)室耗材設(shè)備,胎牛血清
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