進(jìn)口ELISA試劑盒單克隆抗體制備時(shí)很多朋友會(huì)遇到這樣的問(wèn)題，即我們免疫用的蛋白為原核表達(dá)蛋白而目的蛋白是真核蛋白或病毒等，因?yàn)闆](méi)有標(biāo)準(zhǔn)品我們做出來(lái)的抗體沒(méi)有辦法用標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)驗(yàn)證是否與其發(fā)生反應(yīng)，zui終導(dǎo)致我們做出的是無(wú)用抗體。以下內(nèi)容為我公司實(shí)驗(yàn)室技術(shù)總結(jié)的幾種方法供大家參考，希望對(duì)大家有所幫助。
一、若要檢測(cè)抗原為某一細(xì)胞因子
方法：1、 將細(xì)胞系建立后，我們就可以拿到標(biāo)準(zhǔn)品了，做配對(duì)工作就相應(yīng)簡(jiǎn)單。
2、若該種細(xì)胞因子可有某種陽(yáng)性刺激物大量刺激而來(lái)，也可不做細(xì)胞系。用陽(yáng)性刺激物刺激，我們細(xì)胞刺激物的上清液來(lái)做標(biāo)準(zhǔn)品也可。
3、通過(guò)超表達(dá)的方法建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系，注意要在目的蛋白上加相應(yīng)的標(biāo)簽，以便純化。若僅僅是找到配對(duì)抗體則不需要純化甚至不需要建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系瞬時(shí)轉(zhuǎn)染就可實(shí)現(xiàn)，若要進(jìn)一步作出標(biāo)準(zhǔn)曲線請(qǐng)純化。
二、進(jìn)口ELISA試劑盒若要檢測(cè)的抗原為某種新的病毒
方法： 1、將你做出的大量抗體中的一個(gè)做標(biāo)記作為標(biāo)記抗體，其他所有抗體作為包被抗體，檢測(cè)第二步中確定陽(yáng)性的血清，結(jié)果與陰性血清做對(duì)比，并畫(huà)出點(diǎn)狀分布圖。若陽(yáng)性血清大部分的點(diǎn)在陰性血清之上恭喜你找到配對(duì)抗體了；若結(jié)果相差不大，請(qǐng)重新標(biāo)記一株抗體做相同實(shí)驗(yàn)。
2、大量做出該病毒某個(gè)蛋白的單克隆抗體；
3、大量采集該病毒疑似感染動(dòng)物或人血液，用PCR的方法進(jìn)一步確定每份血液是否真的有該病毒存在；
HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗體
HCF2 肝素輔助因子II抗體
HIRA 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體
HAPLN4 透明質(zhì)酸及粘蛋白4抗體
Hippocalcin 神經(jīng)細(xì)胞特異性鈣結(jié)合蛋白抗體
Hairless 無(wú)毛發(fā)蛋白抗體
HAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體
Acetyl-Histone H4 乙?；M蛋白H4抗體
HLA G 人類白細(xì)胞抗原抗體G抗體
HLA G 人類白細(xì)胞抗原抗體G抗體
Hi95 缺氧誘導(dǎo)基因95抗體
HIP2 泛素蛋白連接酶E2抗體
HOXC9 同源盒蛋白HOXC9抗體
HCN2 + HCN4 環(huán)化核苷酸調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型2/4抗體
進(jìn)口ELISA試劑盒
會(huì)員1.png)