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細胞膜的流動性或微粘度

閱讀:647發(fā)布時間:2016-8-2

   ELISA試劑盒膜的流動性或者微粘度,能夠通過丈量到膜雙分子層中的疏水熒光探針的熒光偏振來研討。因為熒光分子吸收偏振光的概率和發(fā)射熒光的偏振度與熒光分子相關(guān)于激起光偏振面的空間取向有關(guān)。
    若以線偏振光激起隨機取向的熒光分子,那么,與激起光偏振面取向共同的那些熒光分子具有zui大的吸收。因為多數(shù)熒光分子的激起太壽數(shù)是幾毫微秒的數(shù)量級,現(xiàn)已吸收了偏振光的一部份熒光分子,到它們發(fā)射熒光時,現(xiàn)已偏脫離它們的初始取向,使得發(fā)射出熒光偏振面的方向?qū)l(fā)生變化。
    若用兩個相互筆直的偏振面丈量發(fā)射的熒光強度之間的,能夠估計熒光分子自由轉(zhuǎn)動的程度。以I1和I2別離代表平行于或者筆直于激起光偏振面的熒光強度。
   流式細胞術(shù)丈量熒光偏振常用的熒光探針為DPH(Di-phenylhexatriene)。DPH是不帶電荷的疏水性物質(zhì),在水介質(zhì)中幾乎沒有熒光,在非極性溶劑頂用紫外光激起,(zui大激起波長為351nm),發(fā)藍色熒光(zui大發(fā)射波長為430nm)。ELISA試劑盒
   DPH的符號程序為:將DPH制備成溶解于THF (Tetrahydrofuran,四氫呋喃)濃度為2nM的貯液,保留于4℃暗處。用PBS稀釋儲存液變成2uM的工作液,關(guān)于含約2×106細胞的1ml細胞懸液(在PBS中),參加1ml DPH工作液,在37℃下消化30分鐘,離心洗細胞后,從頭懸浮在冷PBS中,置于冰上待流式丈量。在熒光顯微鏡下觀察DPH熒光,可見到細胞內(nèi)膜和細胞外膜出現(xiàn)亮堂藍色DPH熒光,其熒光強度約為不染色區(qū)熒光強度的30倍。
    除DPH以外,還有其它一些丈量膜流動性或微粘度的熒光探針,例如DiIC18(3),它的激起zui大值為546nm,發(fā)射zui大值為565nm。還有DMA-DPH(1-(4-dimethylaminop-henyl)-6-phenylhexatriene)),它的激起zui大值為400nm,發(fā)射zui大值為500nm,DMA-DPH除光譜特性比DPH向長波方向移動外,另一個長處是向細胞內(nèi)部符號比DPH慢些。

Carboxypeptidase A2    羧肽酶A2抗體
Contactin 3    腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體
Carboxypeptidase B1    胰羧肽酶B1抗體
CRABP2    細胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體
C2orf80    2號染色體開放閱讀框80抗體
phospho-CD32B(Tyr291)    磷酸化CD32B抗體
Complement C3    過敏毒素C3(補體C3)抗體
CD66c    癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子抗體
CPEB1    細胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體
CST7    半*蛋白酶抑制劑7抗體

ELISA試劑盒

 


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