細(xì)胞培育
1、冷凍管應(yīng)怎么凍結(jié)？
取出冷凍管后， 須當(dāng)即放入37 ℃水槽中快速凍結(jié)， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)悉數(shù)消融， 并留意水面不可超越冷凍管蓋沿， 不然易發(fā)作污染景象。另冷凍管由液氮桶中取出凍結(jié)時， 有必要留意安全， 防止冷凍管之爆裂。ELISA試劑盒
2、細(xì)胞冷凍管凍結(jié)培育時， 是不是應(yīng)立刻去掉DMSO？
除少數(shù)格外注明對DMSO 靈敏之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在凍結(jié)以后， 應(yīng)直接放入富含10-15ml新鮮培育基之培育角瓶中， 待隔天再置換新鮮培育基以去掉DMSO 即可， 如此可防止大部分凍結(jié)后細(xì)胞無法成長或貼附之疑問。
3、可否運用與原先培育條件不一樣之培育基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定運用且已習(xí)慣之細(xì)胞培育基， 若突然運用和原先提供之培育條件不一樣之培育基， 細(xì)胞大都無法當(dāng)即習(xí)慣， 形成細(xì)胞無法存活。
4、可否運用與原先培育條件不一樣之血清品種？
不能。血清是細(xì)胞培育上一個極為重要的營養(yǎng)來歷， 所以血清的品種和質(zhì)量關(guān)于細(xì)胞的成長會發(fā)生*的影響。來自不一樣物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不一樣，血清運用過錯常會形成細(xì)胞無法存活。ELISA試劑盒
5、何謂FBS, FCS, CS, HS ?
FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是一樣的意思， 兩者都是指胎牛血清， FCS 乃過錯的運用字眼， 請不要再運用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。
6、培育細(xì)胞時應(yīng)運用5 % 或10% CO2？或底子沒有影響？
通常培育基中大都運用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖體系， 而培育基中NaHCO3 的含量將決議細(xì)胞培育時應(yīng)運用的CO2 濃度。當(dāng)培育基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時，細(xì)胞培育時應(yīng)運用10 % CO2；當(dāng)培育基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時， 則應(yīng)運用5 % CO2 培育細(xì)胞。
7、何時須替換培育基？
視細(xì)胞成長密度而定， 或遵循細(xì)胞株根本數(shù)據(jù)上之替換時刻，準(zhǔn)時替換培育基即可。
8、培育基中是不是須增加抗生素？
除于特別挑選體系中外， 通常正常培育狀態(tài)下， 培育基中不該增加任何抗生素。
9、附著性細(xì)胞繼代時所運用之trypsin-EDTA 濃度？應(yīng)怎么處理？
通常運用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。開瓶后應(yīng)當(dāng)即少量分裝于無菌試管中， 保留于–20 ℃，防止重復(fù)冷凍凍結(jié)形成trypsin 之活性下降， 并可削減污染之時機(jī)。
10、懸浮性細(xì)胞應(yīng)怎么繼代處理？
通常僅需繼續(xù)參加新鮮培育基于原培育角瓶中， 稀釋細(xì)胞濃度即可， 若培育液太多時， 可將培育角瓶口端略微舉高， 直到無法包容停止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培育液至另一新的培育角瓶， 參加新鮮培育基稀釋至恰當(dāng)濃度， 重復(fù)前述過程即可。
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