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ELISA試劑盒價格測定方法有以下幾點

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ELISA試劑盒價格測定方法有以下幾點
2.1  比色法
比色法是以反應(yīng)生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ),通過比較或測量有色物質(zhì)溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法,根據(jù)原理不同可分為還原糖法和色原底物法。
2.1.1 還原糖法    這種方法是通過酶作用于化學(xué)合成或從自然界提取出來的底物來進行測定的。非淀粉多糖酶與底物在特定的條件(溫度、pH值和底物濃度)下反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物為還原糖,在與顯色劑反應(yīng)后,通過比色確定還原糖的生成量,同時制作標(biāo)準曲線。酶的活性表示為單位時間產(chǎn)生一定濃度的產(chǎn)物所需要的酶量(mg 或mL)。該法可適用于大部分酶活力的測定,如*、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果膠酶、β-葡聚糖酶、纖維素酶等的測定。根據(jù)顯色劑的不同又可分為DNS 法、釩鉬酸銨法和地衣酚法。其中DNS 法由于操作簡單、顯色穩(wěn)定,是目前眾多實驗室和飼料企業(yè)在測定非淀粉多糖酶時應(yīng)用zui多的測定方法。
2.1.2 色原底物法    原理是利用人工合成的含色原基團的底物在酶的作用下釋放出有色物質(zhì),利用分光光度計比色測定有色物質(zhì)的含量計算酶活。如木聚糖酶活力的測定。該法操作簡單、重現(xiàn)性好,但酶作用于合成底物與天然底物的效果有一定區(qū)別,用合成底物測定的酶活并不能代表酶制劑在應(yīng)用于天然飼料時所能發(fā)揮的酶活大小。
2.2  黏度法
這種方法是根據(jù)酶能夠降低一定濃度的標(biāo)準底物(控制pH值、溫度等條件)的黏度的能力來確定酶的活性。利用的底物主要有化學(xué)合成的底物(如CMC 用于纖維素酶的測定) 和自然提取的底物(如小麥阿拉伯木聚糖用于木聚糖酶的測定)。測定的酶的活性值是通過與同時測定的標(biāo)準酶活性的比較,來確定酶的活性。該法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活測定。這種方法的特點是通過降低底物的粘度來反映酶的活性,這也正是酶在體內(nèi)起作用的重要特征。該法雖然靈敏度較高,但重現(xiàn)性差,操作復(fù)雜費時,應(yīng)用難于普及。
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