ELISA實(shí)驗(yàn)中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。完整的兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒應(yīng)該包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；
（3）酶的底物；
（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；
（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；
（6）洗滌液；
（7）酶反應(yīng)終止液。
免疫吸附劑
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個(gè)月。有些不完整的試劑盒，僅供應(yīng)包被用抗原或抗體，檢測(cè)人員需自行包被。以下簡(jiǎn)述固相載體和包被過(guò)程。
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
一、預(yù)試驗(yàn)
（一）抗體包被的酶標(biāo)板的制備
1.以碳酸鹽緩沖液將抗體稀釋成適當(dāng)濃度（參考：5ug/ml），加入酶標(biāo)板（50ul/孔），以膠帶封口，于4℃過(guò)液。
2.棄抗體液，以雙蒸水沖洗3次，自然干燥后以膠帶封口。此為由已知抗體包被的酶標(biāo)板，備用。
（二）底物濃度的摸索
在底物緩沖液中加入不同量的底物（參考：5mg/10ml），加入酶標(biāo)板中（50ul/孔），以膠帶封口，37℃避光保存2h，在沒(méi)有明顯變色的條件下選擇盡可能大的底物濃度。
（三）酶標(biāo)抗原濃度的摸索
選擇明確為陰性的標(biāo)本，加至已包被抗體的酶標(biāo)板中（50ul/ 孔）；用稀釋液稀釋酶標(biāo)抗原至適當(dāng)倍數(shù)（參考：40~4000倍），同時(shí)加入酶標(biāo)板中（50ul/ 孔），混合后封口后于37℃作用30min。以洗液連續(xù)沖洗5次，然后于吸水紙上拍干，加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min，在保持有明顯變色的條件下選擇盡可能小的酶標(biāo)抗原濃度。
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒正式試驗(yàn)
1. 以稀釋液將待檢標(biāo)本做適當(dāng)稀釋（預(yù)試中確定）加入包被有已知抗原的酶標(biāo)板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。
2. 棄反應(yīng)液，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干。
3. 加入酶標(biāo)抗體（濃度在預(yù)試中確定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。
4. 重復(fù)第2步。
5. 加底物（濃度在預(yù)試中確定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時(shí)觀察，顯色滿意后加終止液50ul/孔。
6. 于酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，OPD用492nm測(cè)定，TMB用450nm測(cè)定。
乙醇胺激酶α抗體 0.1ml 英文名稱： Choline kinase alpha 乙醇胺激酶α抗體
胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈1抗體 0.1ml 英文名稱： DYNC1I1 胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈1抗體
胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈2抗體 0.2ml 英文名稱： DYNC1I2 胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈2抗體
抑癌蛋白DKK3抗體 0.1ml 英文名稱： DKK3 抑癌蛋白DKK3抗體
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 0.1ml 英文名稱： DcR1 腫瘤壞死因子配體超家族成員10C
干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體 0.1ml 英文名稱： DNAJC3 干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體 0.2ml 英文名稱： DACH2 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒
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