人CD52 ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)總結(jié)方法
D52試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知CD52濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。人CD52 ELISA檢測試劑盒先將CD52和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CD52的濃度呈比例關(guān)系。
1，包是非常重要的，蛋白質(zhì)濃度，原來的性質(zhì)是否降解，抗體，使你可以識別，從而節(jié)省抗原是非常重要的，我做的重組蛋白，他嚴(yán)厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì)，*和脂類或小分子，我們的裝修之前涂，我簡要如下： 2460親和素-*抗*蛋白涂層：*載體，加入*標(biāo)記的，這種鍍膜的方法均勻，牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原定量測定。ELISA試劑盒脂質(zhì)：可以在有機(jī)溶劑（如酒精）孔加入溶解后，打開冰箱隔夜或冷干，待酒精揮發(fā)，在固體表面上進(jìn)行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
2，包衣液的選擇，碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時(shí)因?yàn)闇y試需求，數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應(yīng)注意以下原則：蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合，取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu)，物理吸附是非特異性的，蛋白分子量，等電點(diǎn)，大集中，小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團(tuán)越多，所以更容易吸附在固相載體表面。測試也有很強(qiáng)的理論于實(shí)踐，看zui后一個(gè)可以應(yīng)用到我們的測試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液，和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
3，關(guān)閉：以下包之后是無關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高，涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。ELISA試劑盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明膠牛血清；脫脂奶粉，價(jià)格相對低廉，可用于高濃度（5%～10%）；和一些罕見的使用各種動(dòng)物血清（主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾）。但到底選擇什么，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)踐。
4，洗板：可以說，在中操作，清洗是在主要的關(guān)鍵技術(shù)。由于聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍存在的，為了實(shí)現(xiàn)自由酶與客觀相結(jié)合的標(biāo)記的分離，在板料孔中殘留游離和吸附的非特異性干擾物質(zhì)的去除，洗滌，并應(yīng)將干擾物質(zhì)洗滌下來的非特異性吸附。所以在洗衣板會(huì)有一定的誤差，非常人的因素（當(dāng)然也有洗衣機(jī)除條件），是不完整的或弦清孔，系統(tǒng)的影響是如此敏感，但不小。
5，加抗體（抗標(biāo)本和兩個(gè)）：注意的槍頭，槍頭。樣品用稀釋稀釋，也可以用稀釋的閉解。如果要添加兩個(gè)電阻，但也要注意兩個(gè)反工作濃度的廢物，太高，太低的光的顏色。
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