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閱讀:98發(fā)布時(shí)間:2014-03-14
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將可再生的生物質(zhì)資源轉(zhuǎn)化為液體燃料產(chǎn)品是具有挑戰(zhàn)性和重要戰(zhàn)略意義的研究方向。自2004年以來,生物質(zhì)轉(zhuǎn)化研究組一直致力于“生物質(zhì)制生物柴油”研究,其核心技術(shù)是利用產(chǎn)油酵母將碳水化合物轉(zhuǎn)化為油脂。研究組在生物質(zhì)原料處理與轉(zhuǎn)化、菌株選育、發(fā)酵過程工程等方面取得了系列成果,并發(fā)現(xiàn)產(chǎn)油酵母R. toruloides抗逆性強(qiáng),碳源利用譜廣,胞內(nèi)油脂富含16或18個(gè)碳原子的長鏈脂肪酸,總脂含量可超過細(xì)胞干重70%,整體性狀優(yōu)良。但是,理性改造R. toruloides以提升油脂發(fā)酵的技術(shù)經(jīng)濟(jì)性遇到了很大困難。這是因?yàn)椋环矫鍾. toruloides屬于擔(dān)子菌門非常規(guī)酵母,與其他子囊菌門微生物(如釀酒酵母、畢赤酵母及解脂亞羅酵母等)相比遺傳差異顯著;另一方面,當(dāng)前上關(guān)于產(chǎn)油真菌的研究整體上不夠深入和系統(tǒng),缺少高質(zhì)量的基因組信息。
該研究組使用高通量測序技術(shù),對R. toruloides進(jìn)行了全基因組測序,得到20.2 Mb的基因組,并在轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)輔助下預(yù)測了8171個(gè)蛋白編碼基因,進(jìn)行了基因功能注釋,形成了高精度的參考基因數(shù)據(jù)庫。進(jìn)一步采用比較轉(zhuǎn)錄組和比較蛋白質(zhì)組方法,研究了氮缺乏導(dǎo)致油脂過量積累的原因。前者通過數(shù)字基因表達(dá)譜技術(shù)鑒定出2030個(gè)在不同培養(yǎng)條件下轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物豐度差異顯著的基因;后者則通過與大連化物所鄒漢法研究員領(lǐng)導(dǎo)的生物分離分析新材料與新技術(shù)研究組(1809組)合作,采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)組定性和半定量分析,確定了538個(gè)豐度顯著變化的蛋白。分析表明,氮缺乏上調(diào)了與氮源利用有關(guān)基因的表達(dá),增強(qiáng)了自噬能力,整體提高了細(xì)胞氮源利用效率,同時(shí)下調(diào)核酸與蛋白合成,并且表達(dá)油脂合成代謝相關(guān)基因受到多種水平的調(diào)控,說明油脂積累涉及細(xì)胞全局性的生理生化響應(yīng)。
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