人胰島素樣生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒本ELISA試劑盒應(yīng)用夾心法測定標(biāo)本中胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）水平。用純化的人胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）受體包被微孔板，往微孔中依次加入胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ），再與HRP標(biāo)記的羊抗人受體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）抗原濃度。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
人胰島素樣生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)人胰島素樣生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．嚴格按照說明書操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7．本試劑不同批號組分不得混用。底物請避光保存。
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)
