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小鼠組織因子途徑抑制物（TFPI）檢測試劑盒基本原理和實驗結(jié)果判斷

閱讀：209發(fā)布時間：2019-1-23

小鼠組織因子途徑抑制物（TFPI）檢測試劑盒  基本原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入*化的抗小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)結(jié)合、*與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)的濃度。

小鼠組織因子途徑抑制物（TFPI）檢測試劑盒     實驗結(jié)果判斷:

1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。

2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

3. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應(yīng)適當稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。


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