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閱讀:337發(fā)布時間:2017-9-27
進口ELISA試劑盒價格標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟:
取7個EP管,第1管放400ul緩沖液,第2到7管放200ul緩沖液。將1.5ul標(biāo)準(zhǔn)品加入到管中,200ul槍輕輕吹打混勻。從第1管中取200ul加入第2管中,吹打均勻。依次稀釋。第7管有400ul液體,zui后只用200ul。
標(biāo)準(zhǔn)品加樣步驟:
從第1管中取100ul加到A1孔,再100ul加到A2復(fù)孔中。
第2到7孔,參考上述步驟。
第8孔,H1和H2加沒有標(biāo)準(zhǔn)品的緩沖液,作為陰性對照。
樣本加樣:
血清或者細胞上清,解凍之后混勻,TSZelisa試劑盒建議3000RPM離心10分鐘,沉淀液體中的固體雜質(zhì)。
按照順序,每孔加100ul樣本,記得做復(fù)孔。加樣體積一定要一樣,但是動作要快。樣本還是一定要保證加到管底,不要粘附到管壁上。
標(biāo)準(zhǔn)品和樣品,每孔100ul,室溫孵育2小時。
6. 棄掉液體,拍干。洗滌3遍。
7. 加檢測抗體(detection antibody,尾端有*biotin),每孔100ul(儲存液也是放-80度,用之前解凍后加緩沖液混勻,稀釋到工作濃度,緩沖液的PH值都已經(jīng)調(diào)到7.2-7.4之間)。
室溫孵育2小時。
備注:以上這些步驟沒有要求避光。所以,每次加樣之后,只要保證把貼膜都貼牢,防止液體蒸發(fā)和孔間干擾即可。
板子可以放在操作臺上。
不過因為操作習(xí)慣,即使不避光的步驟,也可以把板子放在室溫的抽屜里。
8.棄掉檢測抗體液,拍干。
洗滌三遍。
9. 加Streptavidin-HRP(親和素-辣根過氧化物酶),這個一直4度保存,使用的時候200倍稀釋(96孔,9.6ML液體,加48ul的Streptavidin-HRP,9552ul的緩沖液)。
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