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ELISA試劑盒價格檢測原理

閱讀:210發(fā)布時間:2017-6-7

ELISA試劑盒價格檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 。往預(yù)先包被脫氫表雄酮(DHEA)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,
TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脫氫表雄酮(DHEA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值) ,計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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