ELISA試劑盒價(jià)格酵母質(zhì)粒提取方法和步驟
1.接種單菌落(待檢測酵母細(xì)胞)于25mLYNB(補(bǔ)加氨基酸營養(yǎng)物)培養(yǎng)基中，30℃振蕩培養(yǎng)隔夜。
2.第二天取一滴菌液于進(jìn)行顯微鏡下觀察,目鏡用16,物鏡用40倍觀察細(xì)胞壁破碎前的狀態(tài),其成桿狀,流動(dòng)性比較下.
3.取10ml的培養(yǎng)酵母菌液,5000g離心3min,棄上清液.加入5ml的1倍TE懸浮.
4.將懸浮液倒入高壓破壁儀的樣品管中,利用高壓破碎機(jī)進(jìn)行破碎細(xì)胞壁,壓力加到20Mpa,停留15s,降壓,反復(fù)來回壓3次.取出細(xì)胞液,取一滴于顯微鏡下觀察,如果細(xì)胞呈不規(guī)則的球狀時(shí),而且其流動(dòng)性比較大,說明其細(xì)胞壁已經(jīng)破碎成為原生質(zhì)體.
5.取2個(gè)EP管,每管加入1.5ml上述的細(xì)胞液,12000g離心5min,收集原生質(zhì)體.棄取上清液,每管加入300ul10%的SDS溶液,混勻冰浴5min,進(jìn)行破原生質(zhì)體.
6.然后加入150ul的tris飽和酚,和150ul的鹵仿混合液(鹵仿:=24:1),混勻,12000g,離心10min.
7.將水相移到另一EP管中,加入等體積的鹵仿混合液(鹵仿:=24:1),混勻,12000g,離心10min.
8.將水相移到另一EP管中,加入1/10體積的3MKAC溶液和2倍體積的無水乙醇,放入-20℃冰箱中
9.1h,12000g離心10min,倒出乙醇,等干燥后加入1ml的70%的無水乙醇,混勻,12000g,離心10min.
10.棄去乙醇,等室溫干燥后,每管加入20ul的TE溶液(如要去處RNA酶,加入1ul的100mg/ml濃度的RNA酶),放入-20℃冰箱即可.
11.跑電泳進(jìn)行檢測是否從酵母菌中提出質(zhì)粒了。
ELISA試劑盒價(jià)格規(guī)格： 96T/48T 兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔*(NA)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒
規(guī)格： 96T/48T 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒價(jià)格
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