ELISA試劑盒酶的純度以RZ表示：RZ＝OD403/OD275 純酶的RZ多在3.0以上，為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶，非酶蛋白約占 75％，不能用于標(biāo)記。RZ在2.5以上者方可用于標(biāo)記。HRP的作用底物為過氧化氫，催化反應(yīng)時的供氫體有幾種：
（1）鄰苯二胺（OPD），產(chǎn)物為橙色，可溶性，敏感性高，吸收值在490nm，可用肉眼觀察判別，容易被濃硫酸終止反應(yīng)，顏色可在數(shù)小時內(nèi)不改變,是目前國內(nèi)ELISA中zui常用的一種；
（2）聯(lián)大茴香胺（OD）,產(chǎn)物為橘黃色，吸收值在400nm，顏色較穩(wěn)定；
（3）5－氨基水楊酸（5－AS）：產(chǎn)物為深棕色，吸收值在449nm，部分溶解，敏感性較差；
（4）鄰聯(lián)甲苯胺（OT）產(chǎn)物為藍(lán)色，吸收值在630nm，部分溶解，不穩(wěn)定，不耐酸，但反應(yīng)快，顏色明顯。
ELISA試劑盒在酶標(biāo)記過程中，抗體的活性有所降低，故需要純度高、效價高及抗原親和力強(qiáng)的抗體球蛋白.
目前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用zui廣。
1.辣根過氧化物酶（HRP） 過氧化物酶廣泛分布于植物中，辣根中含量，從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶（HRP），是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白（含糖量18％），分子量約40 000，約由300個氨基酸組成，等電點(diǎn)為pH 3-9，催化反應(yīng)的zui適pH值因供氫體不同而稍有差異，一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50％飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的吸收光譜分別為275nm和403nm。
ELISA試劑盒堿性磷酸酶 系從小牛腸粘膜和大腸桿菌中提取，由多個同功酶組成。它們的底物種類很多，常用者為硝基苯磷酸鹽，廉價無毒性。酶解產(chǎn)物呈黃色，可溶，吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應(yīng)系統(tǒng)中，37℃1分鐘水解1μg磷酸苯二鈉為一個單位。
抗體的活性和純度對制備標(biāo)記抗體至關(guān)重要，因為特異性免疫反應(yīng)隨抗體活性和純度的增加而增強(qiáng)。
Acid sphingomyelinase 酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
ANT-1 腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
ALS2CR8 肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體
ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
Azurocidin 肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白抗體
beta-Actin (Loading Control) β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內(nèi)參抗體）
beta-Amyloid 1-42 (CT) β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
beta Amyloid 1-16 β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
beta Amyloid 1-28 β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體
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