ELISA試劑盒雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。那么，為什么雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法?
1、將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2、加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。 洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3、加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合 的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4、 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標(biāo)本中抗原的量。 在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、 AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相 載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測。 在一步法測定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo) 抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應(yīng) 后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同。
Amyloid Precursor Protein 淀粉樣肽前體蛋白抗體
Aquaporin 2 水通道蛋白-2抗體
AGT 血管緊張素原抗體
Androgen receptor 雄激素受體抗體
AVEN 細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
Axin1 軸蛋白1抗體
ATG9B 自噬相關(guān)蛋白9B抗體
Apg12 自噬相關(guān)蛋白12抗體
ATG13 自噬相關(guān)蛋白13抗體
ATG3 自噬相關(guān)蛋白3抗體
ADAMTS4 整合素樣金屬蛋白酶與*4型抗體
phospho-ATF2 (Ser490/498) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
ACTR */*蛋白激酶ATR抗體
ADAM18 去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
ELISA試劑盒
