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技術(shù)文章

ELISA陽(yáng)性判定值法

閱讀:416發(fā)布時(shí)間:2015-4-1

a. 陽(yáng)性判定值法
ELISA試劑盒與間接法和夾心法中的陽(yáng)性判定值法基本相同,ELISA檢測(cè)試劑盒但在計(jì)算公式中引入陽(yáng)性對(duì)照A值,現(xiàn)舉某種檢測(cè)抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿,陽(yáng)性對(duì)照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。ELISA試劑盒測(cè)得A值后,先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均值(NCX)和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例如0.300),試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)小于2.000,而且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算×NCX;如有2個(gè)陰性對(duì)照A超出以上范圍,則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標(biāo)本A值≤陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陽(yáng)性,A>陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陰性。 
b. 抑制率法 
抑制率表示標(biāo)本在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合中標(biāo)本對(duì)陰性反應(yīng)顯色的抑制程度,按下式計(jì)算:
ELISA試劑盒抑制率(%)= (陰性對(duì)照A值-標(biāo)本A值)×100%/陰性對(duì)照A值,一般規(guī)定抑制率≥50%為陽(yáng)性,<50%為陰性。

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