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行業(yè)產(chǎn)品

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上海通蔚實業(yè)有限公司


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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:500條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:帥經(jīng)理 (經(jīng)理)

公司動態(tài)

進口細胞株購買注意事項

閱讀:3617發(fā)布時間:2015-5-17

    由于現(xiàn)在國內(nèi)的細胞庫資料不是很充足,而且比較零散,包括建株時的技術(shù)層面不一,沒有比較嚴格統(tǒng)一的操作規(guī)范,所以在遇到比較重要的實驗項目時,一般都比較傾向于購買國外的細胞株,但購買國外細胞株需要考慮的因素有如下幾點:
1、細胞株的生物等級,由于有些細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報關(guān)時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔擱時間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
4、如果通過國外細胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
a.明確的到貨時間,這個時間需注明的是工作日,還是普通日。
B.采用什么樣的運輸方法?
C.如果屬于技術(shù)外的因素而細胞株無法培養(yǎng)活,供方需負什么樣的責(zé)任?
D.細胞株的詳細資料,以及細胞株的代數(shù),其中,ATCC的細胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認,IST-Banca可與他們的代理商索取詳細資料!
E.需在合同中注明*,避免相關(guān)魚龍渾雜,從國外購買回一株細胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時供應(yīng)給幾個人;一般國外進口的細胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
F.在決定購買細胞株之前,必須仔細閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“細胞株未到,培養(yǎng)基先行一步"。
G.在接到細胞株后,要求供應(yīng)我的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認責(zé)任。
H.在培養(yǎng)前,請確認您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準確性,國外的細胞株建議用進口的細胞培養(yǎng)瓶,比如:orange,corning, falcon品牌的培養(yǎng)瓶。
I.詢問你的代理商或者經(jīng)銷商,接到細胞株后是否需要離心置換出DMSO,因為有些細胞廠家建議不要離心,他們會認為離心而導(dǎo)致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉(zhuǎn)速不要過高,一般都在1000轉(zhuǎn)以下,此處需要注意,因為有的會拿這一點來拒絕索賠!
J.培養(yǎng)基的服務(wù),仔細與供應(yīng)商確認培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應(yīng)商以些理由來*你索賠的理由。
K.在細胞株復(fù)蘇時,一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導(dǎo)致操作中的污染,復(fù)蘇是一個非常重要的步驟,往往容易導(dǎo)致污染,然后為污染所導(dǎo)致的雜質(zhì)而傷透腦筋。
細胞運輸中,還要注意細胞株的反復(fù)凍融情況,有的供應(yīng)商在供應(yīng)細胞株或者培養(yǎng)基時,特別是需要低溫保存的培養(yǎng)基時,通常會出現(xiàn)運輸溫度與儲存溫度的差別,而導(dǎo)致培養(yǎng)基或細胞株融掉后又放進低溫冰箱進行凍存,然后再快遞給我們,特別是血清類制品,如果在接到培養(yǎng)基并解凍后,沉淀和絮狀物較多時,那就要懷疑是否是這種情況!
對于所買回來的細胞簽別,除了顯微鏡下的形態(tài)學(xué)觀察,還有就是特異性實驗,這也是比較重要的!細胞株有些時候復(fù)蘇后剛培養(yǎng)的時候,老師們發(fā)現(xiàn)從形態(tài)上判斷似乎不是自己所需要的細胞株,于是我就建議他做細胞屬性的特異性實驗,ATCC的技術(shù)資料zui后面附有細胞株的代數(shù),以及細胞株經(jīng)過了哪些檢測,細胞株特異性實驗的方法,從而用以確認真正是自己所需要的細胞株!凍存的細胞株,特別是從國外進口的細胞株,應(yīng)該立即復(fù)蘇,盡量不要再凍存,反復(fù)凍融會導(dǎo)致細胞株復(fù)蘇后的活性低!*次接種培養(yǎng)時,應(yīng)以進口的25平方厘米的培養(yǎng)瓶為佳,現(xiàn)在市面上的主要有orange,cornig,BD(Falcon),其中orange價格比較公道5-6元/個,BD(Falcon)zui貴10元左右每個,BD的產(chǎn)品一般用于醫(yī)院生殖中心實驗室人工受精卵的一到三代培養(yǎng)!ATCC的細胞株培養(yǎng)基分為*培養(yǎng)基(原代培養(yǎng)),次培養(yǎng)基(傳代培養(yǎng)基),請大家要注意!
如果細胞運來后,應(yīng)該馬上進行復(fù)蘇,復(fù)蘇時,迅速投入37攝氏度水浴中并不斷振搖,使之迅速融化,離心應(yīng)在1000轉(zhuǎn)/分以下,如果太高速會使本來脆弱的細胞產(chǎn)生較多的碎片,培養(yǎng)過程中,甚至?xí)驗樗槠霈F(xiàn)黑點(一般都是800r/min,5min),棄上清液,以去除二甲基亞砜。加入先前配好的培養(yǎng)基,并在50ml培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。


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