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公司動(dòng)態(tài)

現(xiàn)貨兔ELISA試劑盒檢測(cè)的準(zhǔn)確性

閱讀：401發(fā)布時(shí)間：2015-3-16

    科研生產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段，兔ELISA試劑盒有著十分重要的作用。操作步驟雖然看起來(lái)比較簡(jiǎn)單但是實(shí)驗(yàn)過程有很多的操作要點(diǎn)需要掌握，操作步驟中如果稍有不慎，操作不合理的地方，就會(huì)造成很多問題從而影響到，大大降低試驗(yàn)質(zhì)量。

（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。兔ELISA試劑盒不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：兔ELISA試劑盒即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它兔ELISA試劑盒條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說通常為1～10μg/ml。
（3）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接兔ELISA試劑盒法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。


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