其實ELISA的原理及方法是較為簡單的，相關(guān)ELISA操作的資料，網(wǎng)上一大堆，但是真正到自己上手的時候還是會犯糊涂。今天我們就來仔細(xì)說說這方面的問題，我司技術(shù)解析：實驗新手如何靈活運用ELISA試劑盒？
1.對于一些小分子的檢測，一般來說，要用競爭法ELISA去檢測，也要購買采用這個方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測，因為因子分子量比較大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或者多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不同的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)記的檢測抗體，顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。
2.還有一個問題，這是不是客戶的誤區(qū)，就是拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測。ELISA檢測方法簡單，靈敏度高，但是該檢測活性的檢測活性，該做western的做western。
·特別說明
① ELISA試劑盒規(guī)格有96T和48T兩種，打開包裝后要及時檢查所有物品是否齊全完整。
② 一周內(nèi)使用可存于4℃，需長時間存放或多次使用建議存于-20℃。
對ELISA試劑盒的操作提醒：
① 將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
② 液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
③ 溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
④ 洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
⑤ 洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
