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小鼠肌紅蛋白(Mb)酶聯(lián)免疫方法

閱讀:298發(fā)布時間:2014-9-16

小鼠肌紅蛋白(Mb)酶聯(lián)免疫方法實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠肌紅蛋白(Mb)水平。用純化的小鼠肌紅蛋白(Mb)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入肌紅蛋白(Mb),再與HRP標記的肌紅蛋白(Mb)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌紅蛋白(Mb)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠肌紅蛋白(Mb)濃度。 

小鼠肌紅蛋白(Mb)酶聯(lián)免疫方法操作步驟

標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

4800ng/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

2400ng/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

1200ng/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

600ng/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

300ng/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

E-(Hu)(03)-05293 人補體7(C7)elisa試劑盒 ,英文名: Complement 7,C7 ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05294 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒 ,英文名: amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05295 人chemerin elisa試劑盒 ,英文名: chemerin ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05296 人*Ⅻ(FⅫ)elisa試劑盒 ,英文名: coagulation factor Ⅻ,F(xiàn)Ⅻ ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05297 人類白細胞抗原E(HLA-E)elisa試劑盒 ,英文名: leukocyte antigen E,HLA-E ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05298 人類白細胞抗原A(HLA-A)elisa試劑盒 ,英文名: leukocyte antigen A,HLA-A ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05299 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)elisa試劑盒 ,英文名: Serum amyloid P,SAP ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05300 人活化蛋白C(APC) elisa試劑盒 ,英文名: activated protein C,APC ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05301 人蛋白C(Protein C)elisa試劑盒 ,英文名: Protein C ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05302 人血小板因子3(PF-3)elisa試劑盒 ,英文名: plaet factor 3, PF3 ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05303 人*原片段F1+2(F1+2)ELISA ,英文名: prothrombin fragment 1+2,F(xiàn)1+2 ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05304 人血紅蛋白C(HbC)elisa試劑盒 ,英文名: Hemoglobin C,HbC ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05305 人纖維蛋白(Fibrin)elisa試劑盒 ,英文名: Fibrin ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05306 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)elisa試劑盒 ,英文名: fibrinopeptide B,F(xiàn)PB ELISA Kit ,小鼠肌紅蛋白(Mb)酶聯(lián)免疫方法規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(03)-05307 人纖溶酶原激活劑(PLGA)elisa試劑盒 ,英文名: plasminogen activator,PLGA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T


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