*研究發(fā)現(xiàn)*（Vc）可顯著增強(qiáng)DNA羥化酶Tet氧化5-甲基胞嘧啶的活性，進(jìn)而促進(jìn)DNA去甲基化作用。
DNA甲基化是哺乳動(dòng)物體內(nèi)一種主要的表觀遺傳修飾形式，ELISA試劑盒在X染色體失活、基因組印記、動(dòng)物胚胎發(fā)育、基因表達(dá)調(diào)控等生物過(guò)程中具有重要功能。zui近研究表明，Tet酶可直接氧化5-甲基胞嘧啶生成一種新的堿基5-羥甲基胞嘧啶。該堿基可進(jìn)一步被Tet酶氧化，形成可被細(xì)胞切除的5-甲醛基胞嘧啶和5-羧基胞嘧啶。這些DNA新堿基具有去甲基化作用，可能影響動(dòng)物克隆、細(xì)胞核重新編程和胚胎發(fā)育，同時(shí)也與癌癥發(fā)生密切相關(guān)。但是，目前人們對(duì)這些新DNA堿基調(diào)控的理解仍然非常有限。
Vc是一種人體必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，除了人們熟知的抗壞血病功能之外，還可作為多種雙加氧酶的輔助因子。因此，汪海林研究組設(shè)想Vc也有可能是Tet蛋白（屬雙加氧酶家族成員）的一種新輔助因子。為此，他們首先利用超液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜發(fā)展了高靈敏的5mC氧化產(chǎn)物分析方法。在此基礎(chǔ)上，他們研究了Vc對(duì)Tet酶催化的5mC氧化反應(yīng)及相互作用。體外實(shí)驗(yàn)顯示Vc可顯著增強(qiáng)Tet1和Tet2酶催化氧化5-甲基胞嘧啶的能力。其中，主動(dòng)DNA去甲基化相關(guān)的產(chǎn)物增加量超過(guò)一個(gè)數(shù)量級(jí)。熒光光譜及還原劑比對(duì)分析揭示這種增強(qiáng)效應(yīng)與Vc和Tet間的相互作用直接相關(guān)。將Tet2轉(zhuǎn)入人293T細(xì)胞中，可以觀察到同樣效應(yīng)。對(duì)于Tet1和Tet2基因敲除的小鼠胚胎干細(xì)胞，不再觀察到這種效應(yīng)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)這種Tet酶依賴的5mC氧化增強(qiáng)效應(yīng)，*可顯著刺激小鼠胚胎干細(xì)胞的去甲基化過(guò)程，形成低甲基化的胚胎干細(xì)胞，類似于胚泡中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。利用缺乏合成*基因的小鼠模型，發(fā)現(xiàn)*可調(diào)控腦等多種組織中的DNA羥甲基化與甲基化水平。利用基因本體分析和5hmC富集測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)*引起小鼠胚胎干細(xì)胞內(nèi)545個(gè)基因的5hmC水平顯著升高。這些5hmC富集的基因與細(xì)胞分化、各種組織發(fā)育（包括腦、肌肉、心臟、血液、上皮等）、磷酸化、蛋白質(zhì)合成和復(fù)合體組裝、行為、轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞周期和信號(hào)傳導(dǎo)等功能密切相關(guān)。
ELISA試劑盒該研究*次建立了Vc、Tet 和DNA甲基化調(diào)控之間的直接，證明了*可以調(diào)控哺乳動(dòng)物的DNA修飾，并可解釋*促進(jìn)誘導(dǎo)干細(xì)胞（iPSC）轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制。
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