干細胞增殖及分泌功能
閱讀:502發(fā)布時間:2012-12-24
有研究指出*、噻氯匹定可引起粒細胞減少,*可抑制內皮祖細胞增殖。目前缺乏這些抗血小板藥物會對移植入心肌的骨髓間充質干細胞產生何種作用的報道。目的:探討*、噻氯匹定和*對人骨髓間充質干細胞增殖及分泌功能的影響。
設計、時間和地點:細胞學體外觀察,于2006-03/12在上海市疾病預防控制中心毒理學實驗室完成。
材料:第2代人骨髓間充質干細胞由上海第九人民醫(yī)院組織工程研究中心提供。*、噻氯匹定為杭州賽諾菲圣德拉堡民生制藥有限公司產品,批號分別為國藥準字J20040006和國藥準字H19980186。*由拜耳醫(yī)藥有限公司生產,批號為國藥準字20050059。
方法:骨髓間充質干細胞解凍后,加入含100U/mL*、100mg/L*、10%胎牛血清的低糖DMEM體外擴增培養(yǎng),傳至第6代,分別用不同濃度的*、噻氯匹定、*進行干預處理,并設立空白對照。主要觀察指標:MTT比色法檢測細胞增殖情況,流式細胞儀檢測細胞表面抗原表達,ELISA法測定細胞培養(yǎng)液中血管內皮生長因子濃度。
結果:反映骨髓間充質干細胞增殖變化的A570值在0.02,0.1,0.4,2,10,40μmol/L*或噻氯匹定作用后均明顯高于空白對照(P<0.01);經60,600,2000μmol/L*處理后則低于空白對照(P<0.05)。細胞表面抗原CD34、CD105、CD106陽性細胞百分率經3種抗血小板藥物作用后與空白對照基本相似。與空白對照比較,經0.02μmol/L*及5,2000μmol/L*處理后血管內皮生長因子含量無明顯變化(P>0.05);40μmol/L*或噻氯匹定作用后血管內皮生長因子含量均顯著降低;0.02μmol/L噻氯匹定作用后血管內皮生長因子含量顯著升高(P<0.01)。
結論:*和噻氯匹定對人骨髓間充質干細胞具有明顯的促增殖作用,*可抑制其增殖。高濃度*和噻氯匹定能夠抑制人骨髓間充質干細胞分泌血管內皮生長因子,低濃度噻氯匹定可促進其分泌。此3種抗血小板藥物對人骨髓間充質干細胞的進一步分化無明顯影響。