ELISA試驗操作所要求的條件是比較嚴厲的，無論是對試驗的硬件條件仍是對試驗的操作人員的技能要求，都是如此。下面所說到的就是一些在進行ELISA試驗時所要留意的一些問題。
1、要確保移液槍的準確性，差錯不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行斷定。但有專業(yè)人員進行糾正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。汲取不同的液體后，要更換槍頭。即使是汲取規(guī)范品時。
3、要在試驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都康復(fù)到室溫，以使成果更安穩(wěn)。
4、試驗時，要使底物避光保存。
5、用槍汲取液體時速度不能太快，避免發(fā)生氣泡而使汲取量不準確。
6、汲取液體時，要用量程和需要量挨近的槍去吸，削減差錯。
7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體觸摸，可使槍頭上的液滴和孔壁觸摸，液滴會天然流下去。8、液體悉數(shù)加完后，可將酶標板在桌子上平行悄悄晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸騰。
10、洗板時，每次洗液參加后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不行時，可用蒸餾水自行制造PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，參加0.1%的吐溫20作為洗液。參加1/1000的疊氮鈉后可*保存。
12、底物是光靈敏的，要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前，要翻開酶標儀，使之安穩(wěn)10分鐘以上。
14、底物有必定的毒性，停止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免觸摸。
15、待檢樣品要澄清，否則會影
響成果。
16、溫浴時刻應(yīng)恪守試劑盒規(guī)則。
17、應(yīng)盡量做雙孔試驗，這樣才干確保數(shù)據(jù)的準確性。
18、對成果有疑問的樣品要用其它辦法進行確證。
