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ELISA試劑盒不一樣樣本的保留方式

閱讀:238發(fā)布時(shí)間:2017-1-13

ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶符號(hào)的抗原抗體反響在固相表面進(jìn)行的技能。該技能可用于檢查大分子抗原和特異性抗體等,具有迅速、活絡(luò)、簡(jiǎn)潔、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等長(zhǎng)處。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中血清的詳細(xì)處理保留定見:
(1)要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過(guò)氧化物的活性,因而,在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后邊加入的HRP底物反響顯色。
(2)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長(zhǎng),其所排泄的一些酶也許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
(3)血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離,則可以在2~8℃下保留一星期,如為有菌操作,則主張冰凍保留。樣本的*保留,應(yīng)在-70℃以下。
(4)冰凍保留的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后導(dǎo)致假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振動(dòng),重復(fù)倒置混勻即可。
(5)ELISA試劑盒標(biāo)本在保留中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢查。


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