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96T人血清白蛋白ELISA 檢測試劑盒內(nèi)容及其配制

閱讀：407發(fā)布時(shí)間：2013-01-06

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　　人血清白蛋白ELISA檢測試劑盒
　　
　　本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿
　　
　　上海杰蘭爾試劑上海分公司專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長因子試劑盒，提供免費(fèi)代測服務(wù)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證，若存在質(zhì)量問題，我們無條件包退換
　　
　　試驗(yàn)原理：
　　
　　HSA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HSA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HSA和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HSA的濃度呈比例關(guān)系。
　　
　　安全性
　　
　　避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
　　
　　實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
　　
　　不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
　　
　　人血清白蛋白ELISA檢測試劑盒
　　
　　操作注意事項(xiàng)
　　
　　試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
　　
　　實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
　　
　　不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
　　
　　使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
　　
　　使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
　　
　　洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
　　
　　底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
　　
　　加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
　　
　　按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
　　
　　樣品收集、處理及保存方法
　　
　　血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
　　
　　血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
　　
　　細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
　　
　　保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
　　
　　人血清白蛋白ELISA檢測試劑盒
　　
　　操作步驟
　　
　　使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
　　
　　根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
　　
　　加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
　　
　　甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
　　
　　每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
　　
　　甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
　　
　　每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
　　
　　取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
　　
　　在450nm波長處測定各孔的OD值。
　　
　　6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
　　
　　試劑盒性能
　　
　　1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
　　
　　2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
　　
　　3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
　　
　　人血清白蛋白ELISA檢測試劑盒
　　
　　結(jié)果判斷與分析
　　
　　1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
　　
　　2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的HSA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的HSA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
　　
　　3、檢測值范圍：0-240ug/ml
　　
　　4、敏感度：0.1ug/ml
　　
　　MCP-3/CCL7（Monocytechemotacticprotein3）（rat,mouse）單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體（大、小鼠）0.2ml
　　
　　CCL9/CCL10/MIP-1gamma（Macrophageinflammatoryprotein1-γ）巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體0.2ml
　　
　　MC-1R（melanocortin-1-receptor）黑皮質(zhì)素-1受體抗體0.2ml
　　
　　MCT1（monocarboxylatetransporter1）單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體0.2ml
　　
　　Rabbitanti-mouseIgM/APC熒光素APC標(biāo)記兔抗小鼠IgM0.1ml
　　
　　Rabbitanti-horseIgG/APC熒光素APC標(biāo)記兔抗馬IgG0.1ml
　　
　　MCM2（minichromosomemaintenanceprotein2）微小染色體維持缺陷蛋白2抗體0.2ml
　　
　　MCM3（minichromosomemaintenancedeficient3）微小染色體維持缺陷蛋白3抗體0.2ml
　　
　　MCM7（minichromosomemaintenanceprotein7）微小染色體維持缺陷蛋白7抗體0.2ml
　　
　　M-CSF（MacrophageColonyStimulatingFactors）巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體0.1ml
　　
　　M-CSF（MacrophageColonyStimulatingFactors）巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體0.2ml
　　
　　Mcl-1（myeloidcellleukemia1）髓樣細(xì)胞白血病-1抗體0.2ml
　　
　　MDM2（urinedoubleminute2）雙微體2癌基因抗體0.1ml
　　
　　MDM2（urinedoubleminute2）雙微體2癌基因抗體0.2ml
　　
　　Streptavidin/APC熒光素APC標(biāo)記鏈霉親和素0.1ml
　　
　　若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息，請：：帥
　　
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